Vyhláška Ministerstva zemědělství, kterou se provádějí některá ustanovení zákona č. 154/2000 Sb., o šlechtění, plemenitbě a evidenci hospodářských zvířat a o změně některých souvisejících zákonů (plemenářský zákon)

• 1. Údaje jsou do připouštěcího rejstříku zaznamenávány na základě potvrzení o původu nebo průkazu koně. U klisny neregistrované v ústřední evidenci (§ 34 odst. 5 zákona) se uvede nejméně její majitel a všechny další známé údaje o klisně.

• 1. Připouštěcí rejstřík je do konce kalendářního roku vrácen prostřednictvím uznaného chovatelského sdružení osobě pověřené vedením ústřední evidence.

• 1. Připouštěcí rejstřík u anglického plnokrevníka a klusáka sestává z 3 průpisových připouštěcích lístků se stejným registračním číslem, které obsahují:

a) název a adresu osoby pověřené vedením ústřední evidence
b) název stanice hřebců
c) číslo lístku s označením „pro plnokrevný chov“
d) jméno klisny
e) rok narození klisny
f) základní barvu klisny
g) číslo průkazu totožnosti klisny
h) jméno a adresu majitele klisny
i) jméno hřebce, kterým byla klisna připuštěna
j) data připuštění (první a poslední skok v každé říji)
k) potvrzení držitele hřebce o tom, že byla provedena kontrola totožnosti klisny podle průkazu totožnosti a že klisna byla připuštěna přirozenou plemenitbou
l) datum vystavení lístku
m) podpis držitele hřebce

• 1. První připouštěcí lístek zůstává v připouštěcím rejstříku a je zaslán osobě pověřené vedením ústřední evidence prostřednictvím uznaného chovatelského sdružení do 14 dnů po skončení připouštěcí sezóny.

• 1. Druhý lístek je určen pro držitele hřebce.

• 1. Třetí lístek je určen pro majitele klisny a slouží jako hlášení chovatele o výsledku připouštění a obsahuje vedle údajů uvedených v bodě a) až m):

a) údaje o výsledku připuštění, datum narození, pohlaví a barvu hříběte,
b) datum a podpis majitele klisny

• 1. Tento lístek zasílá chovatel prostřednictvím uznaného chovatelského sdružení osobě pověřené vedením ústřední evidence do 3 týdnů po ohřebení klisny (u klisen, které nemají živé hříbě nejpozději do 31. 8. v roce následujícím po připuštění)

Část III.

PLEMENITBA PRASAT

A.

Postupy získávání, posuzování a zpracování spermatu, uchování a výdeje inseminačních dávek kanců

• 1. Odběr spermatu

• 1.1. Odběr spermatu se provádí na inseminačních stanicích po vzeskoku kance na fantom, na odběrových místech na fantom nebo na prasnici v říji, a při ejakulaci vyvolané umělou vagínou, temperovanou na tělesnou teplotu, manuální metodou bez umělé vagíny fixací penisu.

• 1.2. Před odběrem spermatu se u kance očistí vyústění předkožky a jejího okolí nasucho nebo vodou s následným osušením.

• 1.3. Sperma se zachytává do opakovaně nebo jednorázově používaných, nespermicidních jímačů a lze jej v průběhu odběru zbavit želatinózní frakce filtrací přes dvojitou sterilizovanou gázu, převlečenou přes ústí jímače. Opakovaně používané jímače spermatu, zpravidla skleněné, a umělé vagíny jsou před dalším použitím umyty a sterilizovány.

• 1. Hodnocení spermatu

Hodnotí se	způsob hodnocení
barva, pach, konzistence a obsah cizích přimísenin	smyslovým posouzením
objem	odměřením v kalibrované nádobě (v ml) nebo zvážením (v g)
koncentrace spermií	fotometrem nebo počítací komůrkou na krvinky
aktivita spermií	mikroskopicky subjektivním odhadem procenta spermií s přímočarým pohybem dopředu za hlavičkou, při tělesné teplotě vzorku a při zvětšení 1 : 200 –300
výskyt abnormálních spermií	mikroskopicky na obarveném nátěru, nejméně jednou měsíčně (v procentech)
přežitelnost spermií	kontrolou aktivity spermií v průběhu doby použitelnosti ředěného konzervovaného spermatu
mikrobiologický obraz	vyšetření spermatu nejméně jednou za půl roku

• 1. Zpracování spermatu

Sperma pro dlouhodobou konzervaci:	a) konzervuje se zmrazováním v parách tekutého dusíku,
b) ke spermatu se přidávají antibiotika v účinné koncentraci,
c) zmrazené sperma se uchovává v peletách a vydává v tubetách nebo se zmrazuje přímo v obalu, zpravidla v pejetách, ve kterých se rovněž uchovává a expeduje.
d) zmrazené sperma v obalech se uchovává ve speciálních kontejnerech, dlouhodobě ponořené v tekutém dusíku, jehož hladina se kontroluje a doplňuje podle intenzity odparu,
e) přežitelnost spermií se zjišťuje před výdejem k inseminaci, bezprostředně po rozmrazení
Sperma pro krátkou dobu použití:.	a) používají se speciální ředidla pro kančí sperma, ředění spermatu se provádí podle návodu, přiloženého k ředidlu výrobcem,
b) ředidlo a použité pomůcky pro ředění mají teplotu shodnou s teplotou spermatu ± 1 °C,
c) ředidlo je vždy přiléváno do spermatu,
d) stupeň ředění spermatu se řídí zachováním limitního počtu biologicky aktivních spermií v jedné inseminační dávce,
e) ke spermatu se přidávají antibiotika v účinné koncentraci,
f) obsah biologicky aktivních spermií v čerstvém nativním spermatu se stanoví znásobením celkového počtu spermií aktivitou a odečtením morfologicky abnormálních spermií z posledního vyšetření od výsledku násobku,
g) po naředění se kontroluje aktivita spermií,
h) z každého odebraného spermatu naředěného pro krátkodobou konzervaci se ponechá kontrolní vzorek o objemu cca 20 ml pro sledování přežitelnosti spermií,
i) naředěné sperma pro krátkodobou konzervaci se dávkuje do nespermicidních jednorázových nádob pro více inseminačních dávek, nebo sáčků, flakónů a tubet pro objem jedné inseminační dávky,
j) naředěné sperma se skladuje v tekutém stavu při teplotě 16 ± 2 °C v chladničkách a termoboxech k tomuto účelu upravených nebo vyrobených,
k) postupný pokles teploty spermatu až k teplotě uchování se ohybuje 3 až 4 °C za hodinu,
l) přežitelnost spermií z každého ejakulátu v kontrolním vzorku ředěného spermatu hodnotí v intervalech násobku 24 hodin, podle deklarované konzervační schopnosti použitého ředidla; přičemž přežitelnost spermií nesmí klesnout pod 50 % za 24 hodin uchování

• 1. Uchovávání a výdej inseminačních dávek

Inseminační dávky se vydávají pro přepravu ve speciálních k tomu určených termoboxech, které zabezpečují ochranu dávek proti teplotě vnějšího prostředí po celou dobu přepravy až do převzetí dávek odběratelem, v případě zmrazeného spermatu výlučně v kontejnerech s tekutým dusíkem.

B.

Požadavky na kvalitu a identifikaci spermatu a inseminačních dávek

• 1. Požadavky na kvalitu:

čerstvé sperma po odběru	a) mléčná až šedobílá barva a ostatní charakteristické vlastnosti spermatu (konzistence, bez zápachu), b) objem je nejméně 100 ml; u mladých kanců do věku 12 měsíců a u plemene duroc do 18 měsíců nejméně 80 ml, c) hustota je nejméně 150 000 spermií v mm3, d) obsahuje nejméně 70 % aktivních spermií, e) obsahuje nejméně 75 % morfologicky normálních spermií, f) neobsahuje patogenní mikroorganizmy ani masivní nález nepatogenních mikroorganizmů, g) neobsahuje cizí přimíseniny
krátkodobě konzervované sperma	a) obsahuje nejméně 1,5 x 109 aktivních spermií v jedné inseminační dávce; b) objem jedné inseminační dávky je nejméně 80 ml, c) neobsahuje patogenní mikroorganizmy,
dlouhodobě konzervované sperma	a) aktivita spermií po rozmrazení je nejméně 30 %, b) obsahuje po rozmrazení nejméně 2,5 x 109 aktivních spermií v jedné inseminační dávce, c) neobsahuje patogenní mikroorganizmy,

• 1. Požadavky na identifikaci:

• 2.1. Obaly spermatu při odběru a po celou dobu jeho zpracování jsou označeny registrem kance.

• 2.2. Vzorek pro laboratorní kontrolu přežitelnosti spermií na inseminační stanici (kontrolní vzorek) je označen registrem kance a datem odběru spermatu.

• 2.3. Inseminační dávky jsou označeny registrem kance a datem odběru spermatu, u velkoobjemových obalů současně počtem inseminačních dávek.

C.

Technické vybavení inseminační stanice prasat a odběrového místa

• 1. Vybavení inseminační stanice pro získávání spermatu a produkci inseminačních dávek k výdeji mimo hospodářství

Účel (prostory provozně odděleny)	technické vybavení:
provozně administrativní prostory	pro zaměstnance inseminační stanice, nezbytnou administrativu a pro veterinárního lékaře, obsahující též sklad pro laboratorní materiál, léčiva a jiné pomůcky pro provoz inseminační stanice a oddělené od provozní části stanice,
objekty pro ustájení kanců	individuálními volnými kotce, které mají podlahu s protiskluzovou úpravou, snadno omyvatelnou a desinfikovatelnou, jsou zajištěny před stykem plemenných kanců s jinými druhy a kategoriemi zvířat; ve stáji kanců nejsou chována jiná zvířata.
místnosti pro odběr spermatu	omyvatelnou a desinfikovatelnou pevnou podlahou s protiskluzovou úpravou a omyvatelnými stěnami, fantomem nebo více fantomy, které jsou umístěny samostatně v odběrových hrazených kotcích s únikovým prostorem pro obsluhující zaměstnance, uzavíratelnými mycími a čekacími boxy,
laboratoř	omyvatelnou a desinfikovatelnou pevnou podlahou s protiskluzovou úpravou a omyvatelnými stěnami, zdrojem teplé vody, zařízením pro temperování laboratoře na provozní teplotu, sterilizovanými, nespermicidními manipulačními pomůckami pro zpracování spermatu, ostatními pomůckami desinfikovanými, mikroskopem s vyhřívacím stolkem nebo vyhřívací destičkou, předehřívacím stolkem na sklo používané k mikroskopickému hodnocení, zařízením pro hodnocení koncentrace spermií, vodní lázní nebo topným místem s regulací teploty, zařízením ke sterilizaci, případně dalšími přístroji a zařízeními podle používané technologie zpracování spermatu a výroby inseminačních dávek, v případě používání dlouhodobě konzervovaného spermatu kryokonzervací zvláštní místností ke skladování, dobře větratelnou s omyvatelnou a desinfikovatelnou podlahou, ve které jsou umístěny kontejnery se zmrazenými inseminačními dávkami a kontejnery s pohotovostní zásobou kapalného dusíku,
prostory k uchovávání inseminačních dávek	chladnička, chladnička s regulací teploty pro uchovávání spermatu
prostory pro výdej inseminačních dávek	podávací okénko nebo jiné zařízení pro předávání inseminačních dávek
prostory k mytí, desinfekci a skladování dopravních obalů	manipulační stolek s omývatelnou deskou, úložnými prostorami pro desinfekční prostředky a pro uskladnění přepravních obalů, pokud jsou používány

• 1. Inseminační stanice pro produkci čerstvého a krátkodobě konzervovaného spermatu používaného k inseminaci plemenic v rámci jednoho hospodářství

Účel (prostory provozně odděleny)	Technické vybavení:
prostory, umožňující práci veterinárního lékaře, hygienický a bezpečný odběr spermatu a skladování materiálu,	není specifikováno
objekty pro ustájení kanců	Individuální volné kotce, které mají podlahu s protiskluzovou úpravou, snadno omyvatelnou a desinfikovatelnou, jsou zajištěny před stykem plemenných kanců s jinými druhy a kategoriemi zvířat
pro ředění spermatu a přípravu inseminačních dávek a jejich výdej pro inseminaci plemenic	zařízením pro temperování laboratoře na provozní teplotu, sterilizovanými, nespermicidními manipulačními pomůckami pro zpracování spermatu, ostatními pomůckami desinfikovanými, zařízením ke sterilizaci pomůcek, případně dalšími přístroji a zařízeními podle používané technologie zpracování spermatu a výroby inseminačních dávek, chladnička s regulací teploty pro uchovávání spermatu

• 1. Podmínky, které musí být zajištěny pro odběr spermatu kance na odběrovém místě

• 3.1. základní zooveterinární podmínky odběru spermatu

• 3.2. odběr vzorků pro vyšetření čerstvého spermatu

• 3.3. předředění odebraného spermatu

• 3.4. přeprava a výdej spermatu na inseminační stanici k rozboru a zpracování inseminačních dávek

• 3.5. kopie potvrzení o původu dárce spermatu, záznam o odběru, označenými obaly na kontrolní vzorky a sperma

D.

Druh a obsah evidencí vedených na inseminační stanici

Druh evidence:	obsah evidence:
1. stájová evidence kance	a) ušní číslo kance, b) číslo státního registru kance, c) datum narození kance
2. evidenční karta kance	a) identifikační údaje kance, b) potvrzení o původu, c) všechny záznamy veterinárního dozoru, d) ostatní doklady týkající se kance
3. záznam o odběru spermatu	všechny údaje o hodnoceném spermatu včetně jeho zpracování a kontroly přežitelnosti spermií v chronologickém sledu
4. záznam o výdeji inseminačních dávek	a) jméno, název odběratele, b) datum výdeje, c) datum odběru spermatu, d) číslo státního registru a linie kanců, e) počet inseminačních dávek

E.

Technologické a hygienické postupy při inseminaci a skladování inseminačních dávek

• 1. Inseminační dávky jsou dopravovány v tepelně izolovaných přepravních nádobách vyhovujících technologii konzervace spermatu.

• 1. Inseminace se provádí ve stájích prasnic v individuálních nebo skupinových kotcích na základě sledování nástupu říje.

• 1. Vyhledávání říjících se plemenic se provádí za pomoci kance působícího v přirozené plemenitbě. V chovu bez kance provádí vyhledávání říje osoba, která provádí inseminaci dotykovým testem nebo s použitím kančího feromonu.

F.

Technické vybavení pro provádění inseminace prasnic

technické vybavení
místnost pro uložení inseminačních dávek a pomůcek	chladnička s termostatem, který umožňuje udržovat vnitřní teplotu 16 ± 2 °C, nekouřové vytápění, zdroj vody, pracovní stůl a skřín pro ukládání ochranných pracovních prostředků a pomůcek
pomůcky pro inseminaci	zavaděče, tepelně izolovaná brašna na přenášení inseminačních dávek a pomůcek do stáje prasnic, buničitá vata a bílá vazelína v tubě, barva pro označování zvířat

G.

Podmínky pro zabezpečení řádného a bezpečného provádění inseminace prasnic

K zajištění inseminace chovatel zabezpečí

• 1. osobu, která vodí kance k vyhledávání říjících se plemenic; kanec může být též fixován dvěma pevnými zábranami v manipulační chodbě u kotce,

• 1. při inseminaci prasnic přítomnost kance, kterého fixuje v manipulační chodbě u kotce nebo přímo v kotci pevnými zábranami, odděleně od prasnice,

• 1. při inseminaci ve skupinových kotcích zabezpečí chovatel oddělení inseminované prasnice od ostatních zvířat, případně pomoc osoby, která oddělí ostatní prasnice v kotci.

H.

Druh a obsah evidencí o inseminaci prasnic, způsob jejich předávání osobě pověření vedením ústřední evidence

Chovatelé vedou:

druh evidence:	obsah evidence:
1. stájová evidence plemenice	a) ušní číslo, b) matriční nebo pořadové číslo, c) datum narození, d) datum posledního porodu plemenice,
2. evidenční karta plemenice	a) původové číslo zvířete b) matriční nebo pořadové číslo plemenice, c) datum narození, d) datum zapuštění, po kterém plemenice zabřezla, d) číslo státních registrů připouštěných plemeníků, e) datum každého porodu, f) počty všech a živě narozených selat

Osoba pověřená vedením ústřední evidence přejímá, zpracovává a vyhodnocuje údaje o inseminaci prasnic jen na základě žádosti chovatele, jemuž předává vyhodnocené údaje v dohodnutých termínech a za smluvních podmínek.

Část IV.

PLEMENITBA OVCÍ A KOZ

A.

Postupy získávání, posuzování, a zpracování spermatu, uchovávání a výdeje inseminačních dávek

• 1. Odběr spermatu

• 1.1. Odběr spermatu u beranů a kozlů se provádí po očištění plemeníka a omytí a osušení předkožky, pomocí umělé vagíny, vyjmuté z termostatu o teplotě 41 až 43 °C, s frekvencí odběru v době připouštěcí sezóny u starších beranů 4 a vícekrát týdně, u mladších 2 až 3 krát týdně, u kozlů starších jednoho roku 4 a vícekrát týdně, u mladších s nižší frekvencí podle kondice.

• 1.2. Po odběru je sběrač s čerstvým spermatem, označený značkou a číslem státního registru plemeníka, oddělen a předán do laboratoře k hodnocení kvality.

• 1.3. Vzorky k mikroskopickému posouzení jsou získávány sterilními pomůckami do 10 minut po odběru.

• 1. Hodnocení spermatu

Hodnocení spermatu se provádí posouzením jednotlivých vlastností spermatu podle charakteristických znaků a projevů metabolizmu při pokojové teplotě 20 až 25 °C.

Hodnocení:	hodnotí se:	způsob hodnocení:
čerstvé sperma	zdravotní nezávadnost spermatu	nejméně jednou za půl roku veterinárním vyšetřením
objem	měřením nebo vážením s přesností na 0,1 cm3 (0,1 g)
barva, konzistence, pach a obsah přimísenin	smyslovým posouzením
hustota spermatu	fotometricky u každého ejakulátu (kontrolní propočty, případně kalibrace přístrojů se provádějí v Bürkerově komůrce)
aktivita spermatu	mikroskopicky u každého ejakulátu při zvětšení 1: 200 až 300 a při teplotě 39 ± 1°C, kdy se zjišťuje odhadem procentické zastoupení spermií pohybujících se vpřed za hlavičkou
výskyt abnormálních spermií	mikroskopicky při zvětšení 1 : 1000 až 1500 a vyjadřuje se v %, u provozních beranů a kozlů nejméně jednou za měsíc
krátkodobě uchovávané sperma	aktivita spermatu*)	jako u čerstvého spermatu
počet aktivních spermií v inseminační dávce	v 10 čtvercích v Bürkerově komůrce tak, že průměrný počet spermií ve čtverci se přepočte na velikost inseminační dávky a vynásobením počtu všech spermií procentem aktivity se zjistí počet aktivních spermií v inseminační dávce,
přežitelnost	tepelným testem
1. u beraního spermatu tak, že 0,1 cm3 ředěného spermatu ve zkumavce se vloží do vodní lázně o teplotě 45 ± 1 °C, za 30 minut se ke spermatu přidá 1 cm3 citronanu sodného zahřátého na teplotu 39 ± 1 °C a aktivita se posoudí jako u čerstvého spermatu,
2. u kozlího spermatu tak, že 0,1 cm3 ředěného spermatu se ve zkumavce s 1 cm3 fyziologického roztoku NaCl inkubuje ve vodní lázni o teplotě 47,5 °C po dobu 10 minut a po této době se hodnotí aktivita jako u čerstvého spermatu
dlouhodobě uchovávané sperma**)	aktivita spermií**)	peleta beraního spermatu	vloží se do malé zkumavky předehřáté asi na 40 °C a ve vodní lázni se rozmrazí „na sucho“, poté se přidá 1,0 cm3 citronanu sodného o teplotě 39 ± 1 °C a aktivita spermií se posuzuje jako u čerstvého spermatu,
peleta kozlího spermatu	rozmrazí se v 1,0 cm3 citronanu sodného o teplotě 39 ± 1 °C a aktivita spermií se posuzuje jako u čerstvého spermatu,
pejeta	rozmrazí se ve vodní lázni o teplotě 39 ± 1 °C, její obsah se promíchá a vypustí do zkumavky s roztokem citronanu sodného a aktivita spermií se posuzuje jako u čerstvého spermatu,
počet aktivních spermií	jako u krátkodobě uchovávaného spermatu
přežitelnost rozmrazeného beraního spermatu	tepelným testem tak, že se peleta rozmrazí „na sucho“ ve zkumavce ve vodní lázni o teplotě 45 ± 1 °C po dobu 30 minut, poté se přidá k rozmrazené peletě 1,0 cm3 roztoku citronanu sodného o teplotě 45 ± 1 °C a poté se aktivita hodnotí jako u čerstvého spermatu

Poznámky:

*) u každého naředěného ejakulátu se vzorky odebírají sterilně a vyšetřují se bezprostředně po přípravě

**) vzorky se odebírají sterilně a vyšetřují se bezprostředně po rozmrazení

***) u každého ejakulátu na pracovišti, kde bylo sperma zmraženo a u každého ejakulátu před expedicí

• 1. Zpracování spermatu

• 3.1. Ke zpracování spermatu se používají ejakuláty, které odpovídají požadavkům uvedeným v bodě B.

• 3.2. Veškeré předměty přicházející do styku se spermatem musí být sterilní.

• 3.3. Produkty živočišného původu používané při ošetření spermatu jsou zdravotně nezávadné.

• 3.4. Sperma se ředí při laboratorní teplotě 20 až 25 °C, k ředění se používají pouze média, která po konzervaci uchovávají dobrou oplozovací schopnost spermatu a jeho zdravotní nezávadnost a ředí se technologickým postupem podle pokynů výrobce ředidla.,

• 3.5. Do spermatu se přidávají antibiotika v účinné koncentraci

• 1. Uchovávání a ředění spermatu

Krátkodobě uchovávané sperma	beraní sperma	při teplotě 16 až 22 °C při ředění homogenizovaným mlékem
kozlí sperma	při teplotě 1až 3 °C při ředění žloutkocitronanovým ředidlem
Dlouhodobě uchovávané sperma	při teplotě –196 °C v tekutém dusíku, který nebyl použit pro jiné produkty živočišného původu

• 1. Výdej inseminačních dávek

Inseminační dávky s krátkodobým použitím	vydávají se podle podmínek daných technologickým postupem;
ředěné beraní sperma	vydává se v termoboxu s takovým množstvím ledu, aby teplota byla v rozmezí 16 až 22 °C,
ředěné kozlí sperma	vydává se v termoboxu s takovým množstvím ledu, aby teplota byla v rozmezí 1 až 3 °C
Zmrazené inseminační dávky	vydávají se v kontejnerech v tekutém dusíku, které jsou uvnitř uzpůsobeny použité technologii zmrazování v peletách nebo pejetách a náležitě desinfikovány před každým naplněním tekutým dusíkem, který nebyl použit pro jiné produkty živočišného původu, přičemž interval desinfekce je dán typem a používáním kontejneru

B.

Požadavky na kvalitu a identifikaci spermatu a inseminačních dávek

• 1. Požadavky na kvalitu:

čerstvé sperma	a) neobsahuje patogenní mikroorganizmy (včetně patogenních plísní) a původce nebezpečných nákaz a nemocí,
b) neobsahuje přimíseniny ani shluky spermií,
c) hustota je nejméně u beraního spermatu 2,5 x 106 spermií v 1 mm3 a u kozlího spermatu 2,8 x 106 spermií v 1 mm3,
d) aktivita spermií je nejméně u beraního spermatu 60 % a u kozlího spermatu, 70,0%
e) morfologicky normálních spermií je u beraního spermatu nejméně 80 % a u kozlího spermatu,85 %
krátkodobě uchovávané sperma	vyhovuje ustanovením pro čerstvé sperma a po ředění a konzervování:
a) je aktivita spermií nejméně 60 %,
b) v jedné inseminační dávce beraního spermatu je nejméně 100 x 106 aktivních spermií, u kozlího spermatu 50 x 106 aktivních spermií
dlouhodobě uchovávané sperma	vyhovuje požadavkům pro čerstvé sperma a po ředění a konzervován:
a) je aktivita spermií po rozmrazení u beraního spermatu nejméně 25 % a u kozlího spermatu nejméně 30 %
b) je v jedné inseminační dávce beraního spermatu nejméně 100 x 106 aktivních spermií, u kozlího spermatu 50 x 106 aktivních spermií

• 1. Požadavky na identifikaci:

Obal spermatu při odběru, zpracování, uchovávání a transportu je vždy zřetelně označen státním registrem plemeníka.

C.

Technické vybavení inseminační stanice a odběrového místa ovcí a koz

Část inseminační stanice	technické vybavení:
Prostory pro ustájení	plemenní berani jsou ustájeni v kotcích s plochou 3,5 m2 na kus se stálým přívodem pitné vody do automatických napáječek a krmnými žlaby, kotce mají pevné, snadno čistitelné a desinfikovatelné podlahy
plemenní kozli jsou ustájeni v indidviduálních kotcích s plochou nejméně 3,5 m2 a s neprůhlednými bočními stěnami; kotce mají pevné, snadno čistitelné a desinfikovatelné podlahy
Prostory pro odběr spermatu	připouštědlo (v místnosti nebo venku), kompletní umělé vagíny, včetně sběračů a tepelné izolace, pomůcky a prostředky pro odběr spermatu (sterilní vazelína, jednorázové rukavice, teploměr, dezinfekční prostředky)
Laboratoř pro hodnocení a zpracování spermatu	mikroskop se zvětšením 1 : 1000 až 1500, mikroskopem s fázovým kontrastem, fotometr, termostat, Bürkerova počítací komůrka, termostat, chladnice nebo chladící vitrína, zařízení na plnění, zatavování a značení pejet, rampay, širokohrdlé kontejnery s termočlánkem nebo automatickým zmrazovačem, teploměry, ředidla, antibiotika, pejety
Prostory pro dezinfekci a sterilizaci	horkovzdušný sterilizátor a desinfekční chemikálie, zdroj teplé vody*)
Prostory pro uložení inseminačních dávek	provozní kontejnery, zásobní kontejnery pro uložení pejet nebo pelet, transportní kontejnery, polystyrénové nádoby na tekutý dusík, rukavice, pomůcky a ochranný štít pro manipulaci s tekutým dusíkem

Vybavení odběrového místa

Odběrové místo splňuje podmínky ustájení a požadavky na technické vybavení, kterými lze zajistit hygienický odběr spermatu, jeho zpracování a uložení.

D.

Druh a obsah evidencí vedených na inseminační stanici

druh evidence:	obsah evidence:
1.stájová evidence plemeníka	a) ušní číslo, b) číslo státního registru plemeníka, c) plemeno a datum narození plemeníka
2. evidenční karta plemeníka	a) identifikační údaje plemeníka, b)záznamy veterinárního dozoru, c) ostatní doklady týkající se plemeníka
3. záznam o odběru spermatu	všechny údaje o hodnoceném spermatu včetně jeho zpracování a kontroly přežitelnosti spermií v chronologickém sledu
4. záznam o výdeji inseminačních dávek	a) jméno, název odběratele, b) datum výdeje, c) datum odběru spermatu, d) číslo státního registru a linie plemeníků, e) počet inseminačních dávek

E.

Technologické a hygienické postupy při inseminaci a skladování inseminačních dávek

• 1. Před inseminací plemenice provede osoba oprávněná nebo chovatel provádějící inseminaci reprodukční anamnézu: po posouzení záznamů v dokladu plemenice zhodnotí dobu po jejím obahnění nebo okozlení do ohlášení říje, případně dobu od poslední inseminace a z inseminace vyloučí plemenice s nefyziologickým výtokem z pohlavních orgánů, s příznaky nákazy nebo jiného onemocnění, plemenice mimo říji a plemenice neoznačené.

• 1. Říjící se ovce nebo kozy jsou vybírány zpravidla s pomocí plemeníka, který působí v přirozené plemenitbě. Inseminace ovcí se provádí od poloviny do začátku třetí třetiny říje, mezi 12 až 18 hodinou říje, u koz zpravidla 10 až 12 hodin od nástupu říje.

• 1. K inseminaci se používá jen sperma splňující stanovené podmínky, při dodržení technologického postupu přípravy inseminační dávky.

• 1. Při inseminaci postupuje oprávněná osoba nebo chovatel tak, že:

• 4.1. dbá o hygienu inseminace,

• 4.2. inseminaci provádí v připouštědlech,

• 4.3. dodržuje správný postup inseminace ovcí a koz čerstvým nebo zmraženým spermatem.

F.

Technické vybavení pro provádění inseminace ovcí a koz (podle druhu inseminačních dávek)

• 1. spekulum s vnitřním osvětlením,

• 1. skleněné nebo jednorázové plastové pipety,

• 1. výtlačné gumové balonky nebo jednorázové injekční stříkačky,

• 1. transportní kontejner s vnitřním vybavením,

• 1. parafinový olej, líh, vata a nůžky.

G.

Druh a obsah záznamů o inseminaci, způsob jejich předávání osobě pověřené vedením ústřední evidence

• 1. Chovatelé vedou stájový zápisník plemenic zařazených do inseminace, do kterého zaznamenávají ušní čísla a data narození plemenic a osoby oprávněné a chovatelé provádějící inseminaci do něj zaznamenávají údaje o každé inseminaci.

• 1. Osoba pověřená vedením ústřední evidence přejímá, zpracovává a vyhodnocuje údaje o inseminaci bahnic jen na základě žádosti chovatele, jemuž předává vyhodnocené údaje v dohodnutých termínech a za smluvních podmínek.

Příloha č. 6 k vyhlášce č. 471/2000 Sb.

STŘEDISKA PRO PŘENOS EMBRYÍ

Část I.

Technologické a hygienické postupy získávání, kultivace a uchovávání embryí, vaječných buněk a přenosu embryí

• 1. Při získávání, kultivaci a uchovávání embryí se dodržují tyto zásady hygieny:

• a) všechny nástroje a média, které přicházejí do styku s dárkyní, embryi a příjemkyní jsou sterilní a jsou uzpůsobeny tak, aby se omezila možnost sekundární kontaminace,

• b) produkty živočišného původu používané do vyplachovacích, kultivačních a zmrazovacích médií pocházejí ze zdrojů, které nepředstavují riziko pro zdraví zvířat, nebo jsou před použitím ošetřeny takových způsobem, který toto riziko vylučuje,

• c) kontejnery pro uložení a transport embryí jsou před každým naplněním dezinfikovány,

• d) tekutý dusík nebyl předtím použit pro jiné produkty živočišného původu.

• 1. Embrya se získávají zpravidla nechirurgickým výplachem děložních rohů dárkyně sedmý den po inseminaci. Výplach embryí se provádí v místě, které je možno snadno čistit.

• 1. Embrya se izolují, hodnotí, promývají a zpracovávají v místnosti izolované od místa výplachu.

• 1. Embrya se vyhledávají stereomikroskopem a vyhledaná embrya se přenášejí mikropipetou do manipulačního média.

• 1. Embrya se hodnotí podle části II. této přílohy a poté se speciálně ošetřují

• a) mechanickými, 10 x opakovanými oplachy v kultivačním mediu; mezi jednotlivými oplachy se vymění mikropipeta a pro embrya každé dárkyně jsou použita nová média,

• b) metodou enzymatického ošetření, která je účinná při kontaminaci viry adherujícími na zonu pellucidu, jejíž součástí je krátkodobé vystavení embryí působení trypsinu.

• 1. Embrya se uchovávají

• a) krátkodobě tak, že

• 1. po vyhledání, hodnocení a dekontaminaci se přemísťují do 2 cm^3 kultivačního media,

• 1. uchovávají se při pokojové teplotě,

• 1. před přenosem se plní do označených pejet o průměru 2,4 mm,

• b) dlouhodobě tak, že

• 1. ve zmrazovacím médiu v pejetách se vkládají do zmrazovače,

• 1. zmrazovací režim je dán použitým médiem,

• 1. při dosažení teploty nejméně –30 °C se pejety přenesou do tekutého dusíku.

• c) vitrifikací

• 1. Před rozmrazením se pejeta vyjme z tekutého dusíku, ponechá se na vzduchu asi 10 sekund a poté ponoří na 10 sekund do vodní lázně o teplotě 37 °C. Vymývání glycerinu se provádí ve 3 stupních pomocí sacharózy. Přenos je nutno provést ihned po rozmrazení a vymytí glycerinu. Při použití etylenglykolu je nutno provést přenos ihned po rozmrazení.

• 1. Přenos embryí se provádí nechirurgicky speciální aparaturou, která umožňuje provést přenos hygienicky, lehce, atraumaticky. Při přenosu embryí se dodržují hygienické podmínky.

• 1. Vaječné buňky se získávají z ovarií odporažených dárkyň „post mortem,, nebo metodou OPU punkcí ovariálních folikulů od žijících dárkyň. Vaječné buňky se používají v rámci programu in vitro produkce embryí. Embrya vyprodukovaná v podmínkách in vitro se hodnotí a uchovávají stejně jako embrya vzniklá in vivo.

Část II.

Postupy hodnocení kvality embryí a vaječných buněk

• 1. Orientační posouzení kvality embryí se provádí mikroskopicky již při jejich vyhledávání. K dalšímu použití se určují pouze embrya, která odpovídají stupněm vývoje délce postovulačního období.

• 1. Embrya se po zhodnocení zařadí do kvalitativních skupin. Morfologicky nejkvalitnější embrya jsou vhodná ke zmrazování, embrya se zastaveným vývojem a dalšími abnormalitami se vyřazují.

• 1. Pejety se zmrazenými embryi nebo jejich zátky se popisují (pejety směrem od zavařeného konce), Při popisu se uvádí

• a) číslo pejety, které se přenáší z deníku zmrazování embryí,

• b) číslo přenosového týmu (veterinární registrační číslo),

• c) značka plemene (alfabetické označení),

• d) matka embrya, (devítimístné číslo ušní známky),

• e) otec embrya, (značka registru a číslo registru),

• f) den, měsíc, rok zmrazení, přičemž každý údaj je dvojmístný,

• g) počet embryí v pejetě (v případě přímého přenosu se zmrazuje v pejetě vždy jen jedno embryo).

Část III.

Požadavky na technické a přístrojové vybavení střediska pro přenos embryí

laboratoř	zdroje teplé vody, destilovaná voda, sterilizátor, chladnice a mraznice, vodní lázeň na medium, stereomikroskop se spodním osvětlením
zařízení pro čištění, sterilizaci a desinfekci
místnost pro kontejnery se zmrazenými embryi	přepravní nádoby na dusík, polystyrénové nádoby na dusík a zmrazovače embryí
další pomůcky a zařízení potřebná pro výplach, hodnocení, uchovávání a přenos embryí	zejména vyplachovací FOLEYE a katetry, vyplachovací, manipulační, kultivační, zmrazovací a vymývací medium, pejety, přenosné aparatury s krytem, desinfekční prostředky

Část IV.

Druh záznamů o přenosu embryí a vaječných buněk a způsob jejich předávání osobě pověřené vedením ústřední evidence

• 1. Osoba oprávněná k přenosu embryí vede záznamy

• a) přenosových týmů,

• b) dárkyň,

• c) příjemkyň,

• d) zmrazených embryí,

• e) prodeje a vývozu embryí.

• 1. Tyto záznamy předává osoba oprávněná k přenosu embryí osobě pověřené vedením ústřední evidence v rozsahu a v termínech stanovených touto osobou.

Příloha č. 7 k vyhlášce č. 471/2000 Sb.

OBSAH PRŮVODNÍHO LISTU DOVÁŽENÉHO SPERMATU, EMBRYÍ A VAJEČNÝCH BUNĚK

Část I.

Průvodní list dováženého spermatu skotu, prasat, ovcí a koz obsahuje tyto údaje:

PRŮVODNÍ LIST DOVÁŽENÉHO SPERMATU SKOTU, PRASAT, OVCÍ A KOZ
Část A. Údaje o dárci spermatu
1. Druh (skot, prase, ovce, koza)	2. Plemeno, typ
3. Název osoby, která vystavila průvodní list
4. Název osoby, která vede plemennou knihu v zemi původu zvířete
5. Příjmení, jméno a trvalý pobyt nebo název a sídlo chovatele
6. Jméno (nepovinné označení) zvířete	7. Číslo v plemenné knize
8. Datum narození	9. Geneticky typ*)
10. Původ**)
Otec (číslo plemenné knihy)	Otec otce (číslo plemenné knihy)
	Matka otce (číslo plemenné knihy)
Matka (číslo plemenné knihy)	Otec matky (číslo plemenné knihy)
	Matka matky (číslo plemenné knihy)
11.Výsledky testování užitkových vlastností a odhadu plemenné hodnoty, jméno osoby, která provedla odhad plemenné hodnoty zvířete, jeho rodičů a prarodičů***)
12. Spolehlivost (u býků mléčných plemen)
Část B. Údaje o spermatu
1. Systém označení inseminačních dávek****)	2. Systém označení kontejneru
3. Název a adresa inseminační stanice, ve které bylo sperma odebráno
4. Příjmení, jméno a trvalý pobyt nebo název a sídlo tuzemského příjemce inseminačních dávek
Označení inseminačních dávek	Počet dávek	Druh inseminační dávky (krátkodobě/dlouhodobě konzervovaná)	Datum odběru
Datum a místo vystavení průvodního listu
Příjmení, jméno a podpis osoby, která průvodní list vystavila

Poznámky:

*) Genetický typ stanovený podle používaných metod v zemi původu, jde-li o skot.

**) Údaje mohou být k průvodnímu listu přiloženy formou průkazu o původu.

***) Údaje se uvedou ve zvláštní příloze, která se přiloží k průvodnímu listu.

****) Barva, čísla apod.

Část II.

Průvodní list dováženého spermatu koní obsahuje tyto údaje:

PRŮVODNÍ LIST DOVÁŽENÉHO SPERMATU KONÍ
Část A. Údaje o dárci spermatu
1. Plemeno
2. Název osoby, která vystavila průvodní list
3. Název osoby, která vede plemennou knihu v zemi původu zvířete
4. Způsob (systém) identifikace	5. Identifikační číslo
6. Datum narození	7. Genetický typ (byl stanoven – ano/ne)
8. Příjmení, jméno a trvalý pobyt nebo název a sídlo majitele
9. Název osoby, která vede tuzemskou plemennou knihu
10. Výsledky výkonnostních zkoušek a odhadu plemenné hodnoty*)
Část B. Údaje o spermatu
1. Systém označení inseminačních dávek**)	2. Systém označení kontejneru
3. Název a sídlo inseminační stanice, ve které bylo sperma odebráno
4. Příjmení, jméno a trvalý pobyt nebo název a sídlo tuzemského příjemce inseminačních dávek
Označení inseminačních dávek	Počet dávek	Druh inseminační dávky (krátkodobě/dlouhodobě konzervovaná)	Datum odběru
Datum a místo vystavení průvodního listu
Příjmení, jméno a podpis osoby, která průvodní list vystavila

Poznámky:

*) Údaje se uvedou ve zvláštní příloze, která se přiloží k průvodnímu listu.

**) Barva, čísla apod.

Část III.

Průvodní list dovážených embryí obsahuje tyto údaje:

PRŮVODNÍ LIST DOVÁŽENÝCH EMBRYÍ
Část A. Údaje o otci embrya
1. Druh (skot, prase, ovce, koza)	2. Plemeno, typ
3. Název osoby, která vystavila průvodní list
4. Název osoby, která vede plemennou knihu v zemi původu zvířete
5. Příjmení, jméno a trvalý pobyt nebo název a sídlo chovatele
6. Jméno (nepovinné označení) zvířete	7. Číslo v plemenné knize
8. Datum narození	9. Genetický typ*)
10. Původ (s výjimkou hybridních prasat)**)
Otec (číslo plemenné knihy)	Otec otce (číslo plemenné knihy)
	Matka otce (číslo plemenné knihy)
Matka (číslo plemenné knihy)	Otec matky (číslo plemenné knihy)
	Matka matky (číslo plemenné knihy)
11.Výsledky testování užitkových vlastností a odhadu plemenné hodnoty, jméno osoby, která provedla odhad plemenné hodnoty zvířete, jeho rodičů a prarodičů***)
Část B. Údaje o dárkyni embrya
1. Druh (skot, prase, ovce, koza)	2. Plemeno, typ
3. Název osoby, která vystavila průvodní list
4. Název osoby, která vede plemennou knihu v zemi původu zvířete
5. Příjmení, jméno a trvalý pobyt nebo název a sídlo chovatele
6. Jméno (nepovinné označení) zvířete	7. Číslo v plemenné knize
8. Datum narození	9. Genetický typ*)
10. Původ (s výjimkou hybridních prasat)**)
Otec (číslo plemenné knihy)	Otec otce (číslo plemenné knihy)
	Matka otce (číslo plemenné knihy)
Matka (číslo plemenné knihy)	Otec matky (číslo plemenné knihy)
	Matka matky (číslo plemenné knihy)
11.Výsledky testování užitkových vlastností a odhadu plemenné hodnoty, jméno osoby, která provedla odhad plemenné hodnoty zvířete, jeho rodičů a prarodičů***)
Část C. Údaje o embryích
1. Způsob označení obalů embryí****)	2. Způsob označení kontejneru
3. Název a adresa odběrového týmu, který provedl odběr
4. Příjmení, jméno a trvalé bydliště nebo název a sídlo tuzemského příjemce
Označení obalů	Počet embryí v obalu	Datum odběru
Datum a místo vystavení průvodního listu
Příjmení, jméno a podpis osoby, která průvodní list vystavila

Poznámky:

*) Genetický typ stanovený podle používaných metod v zemi původu, jde-li o skot.

**) Údaje mohou být k průvodnímu listu přiloženy formou průkazu o původu.

***) Údaje se uvedou ve zvláštní příloze, která se přiloží k průvodnímu listu.

****) Barva, čísla apod.

Část IV.

Průvodní list dovážených vaječných buněk obsahuje tyto údaje:

PRŮVODNÍ LIST DOVÁŽENÝCH VAJEČNÝCH BUNĚK
Část A. Údaje o dárkyni vaječných buněk
1. Druh (skot, prase, ovce, koza)	2. Plemeno, typ
3. Název osoby, která vystavila průvodní list
4. Název a sídlo osoby, která vede plemennou knihu v zemi původu zvířete
5. Příjmení, jméno a trvalý pobyt nebo název a sídlo chovatele
6. Jméno (nepovinné označení) zvířete	7. Číslo v plemenné knize
8. Datum narození	9. Genetický typ*)
10. Původ (s výjimkou hybridních prasat)**)
Otec (číslo plemenné knihy)	Otec otce (číslo plemenné knihy)
	Matka otce (číslo plemenné knihy)
Matka (číslo plemenné knihy)	Otec matky (číslo plemenné knihy)
	Matka matky (číslo plemenné knihy)
11.Výsledky testování užitkových vlastností a odhadu plemenné hodnoty, jméno osoby, která provedla odhad plemenné hodnoty zvířete, jeho rodičů a prarodičů***)
Část B. Údaje o vaječných buňkách
1. Systém označení obalů vaječných buněk (barva, čísla, apod.)	2. Systém označení kontejneru
3. Název a sídlo odběrového týmu, který provedl odběr
4. Příjmení, jméno a trvalý pobyt nebo název a sídlo tuzemského příjemce
Označení obalů	Počet vaječných buněk v obalu	Datum odběru
Datum a místo vystavení průvodního listu
Příjmení, jméno a podpis osoby, která průvodní list vystavila

Poznámky:

*) Genetický typ stanovený podle používaných metod v zemi původu, jde-li o skot.

**) Údaje mohou být k průvodnímu listu přiloženy formou průkazu o původu.

***) Údaje se uvedou ve zvláštní příloze, která se přiloží k průvodnímu listu.

^1 § 3 ods. 3 zákona č. 505/1990 Sb., o metrologii a Výměr Úřadu pro technickou normalizaci, metrologii a státní zkušebnictví č. M-108/99 ze dne 6.10 1999, o stanovených měřidlech, uveřejněný oznámením č. 76/99 v č. 12/99 Věstníku Úřadu.

^1) § 21 a 22 zákona č. 89/1995 Sb., o státní statistické službě.

^2) Například osvědčení International Society for Animal Genetics (ISAG) – Mezinárodní společnosti pro živočišnou genetiku.

^3) § 6 až 9 zákona č. 83/1990 Sb., o sdružování občanů, ve znění zákona č. 300/1990 Sb. a zákona č. 68/1993 Sb.

^4) § 2 odst. 2 obchodního zákoníku.

^5) Zákon č. 105/1990 Sb., o soukromém podnikání občanů, ve znění zákona č. 219/1991 Sb. a zákona č. 455/1991 Sb.

^6) International Committee for Animal Recording (ICAR) – Mezinárodní komise pro kontrolu užitkovosti.

^6a) Směrnice Rady 90/428/EHS ze dne 26. června 1990 o obchodu s koňovitými určenými pro soutěže a o podmínkách jejich účasti v soutěžích.

^6b) Rozhodnutí Komise 92/216/EHS ze dne 26. března 1992 o sběru dat týkajících se soutěží koňovitých podle čl. 4 odst. 2 směrnice Rady 90/428/EHS.

^7) § 4 písm. e) zákona č. 246/1992 Sb., na ochranu zvířat proti týrání.

^8) § 61 odst. 1 písm. f) zákona č. 166/1999 Sb., o veterinární péči a o změně některých souvisejících zákonů (veterinární zákon).

^9) § 44 odst. 1 písm. d), § 48 písm. b) zákona č. 166/1999 Sb.

^10) § 28 zákona č. 166/1999 Sb. § 10 vyhlášky č. 286/1999 Sb., kterou se provádějí ustanovení zákona č. 166/1999 Sb., o veterinární péči a o změně některých souvisejících zákonů (veterinární zákon), o zdraví zvířat a jeho ochraně, o veterinárních podmínkách dovozu, vývozu a tranzitu veterinárního zboží, o veterinární asanaci a o atestačním studiu.

^11) § 10 zákona č. 166/1999 Sb.