LegalizeOrden de 31 de julio de 1979 por la que se establecen métodos oficiales de análisis de aceites y grasas, productos cárnicos, cereales y derivados fertilizantes, productos fitosanitarios, productos lácteos, piensos, aguas y productos derivados de la uva
9.6.1 La puesta a punto de la columna se determina obteniendo la resolución de dos productos críticos como son el oleato y el estearato de metilo. La resolución viene determinada por la expresión:
Siendo:
D = distancia entre los dos máximos de los picos del oleato y el estearato.
O = ancho de la base del pico correspondiente al oleato.
E = ancho de la base del pico correspondiente al estearato.
Estos valores se determinan sobre el cromatograma obtenido con una muestra conteniendo cantidades aproximadamente iguales de estearato y oleato de metilo, inyectando una cantidad tal que la altura de estos picos alcance al 25-50 por 100 del ancho del papel de registro. Si la resolución calculada es igual o mayor que 1,0, la columna y el instrumento se encuentran en condiciones satisfactorias. Todas las columnas en el transcurso de su utilización sufren una pérdida gradual en la resolución de los picos; cuando el valor llegue a ser inferior a 1,0, deberá instalarse una nueva columna.
9.6.2 Para la identificación de los picos se pueden seguir dos criterios:
9.6.2.1 Criterio basado en los tiempos de retención.‒Refiriéndonos exclusivamente a los ácidos que entran normalmente en la composición de las grasas naturales, sus ésteres aparecen en el cromatograma en orden creciente de sus átomos de carbono y a su insaturación. Esto es, el palmítico (C16) aparece delante del esteárico (C18), y los ésteres en C18 aparecen en el orden estearato, oleato, linoleato y linolenato. El éster del ácido aráquico (C20:0), usualmente, aparece antes del linolénico (C18:3), pero puede ocurrir lo contrario en algunos casos, dependiendo del tipo de columna y de las condiciones de su utilización, o incluso superponerse el uno al otro.
Operando en condiciones constantes, los tiempos de retención son reproductibles en cada especie química, siendo el criterio más frecuente empleado para su identificación.
El tiempo de retención viene dado por la distancia, medida en el cromatograma, entre el máximo del pico del aire y la posición del máximo de la banda. Trabajando con detector de llama de hidrógeno, la salida del aire no se detecta, pudiéndose tomar, en este caso, el momento en que se inicia la salida del disolvente, acusada por una fuerte deflexión de la pluma del registrador.
9.6.2.2 Criterio basado en los tiempos de retención relativos.‒Los tiempos de retención relativos son más reproductibles. Las retenciones relativas vienen determinadas por el cociente de dividir el tiempo de retención de cada pico por el tiempo registrado para el pico del palmitato de metilo, o bien por otro éster que se tome como comparación, determinados todos ellos según el criterio expuesto en el párrafo anterior.
9.7 Referencias.
1. Instituto de Racionalización y Normalización del Trabajo. Una Norma Española 55.118.
QUESO
1. EXTRACCIÓN DE LA GRASA DEL QUESO
1.1 Principio.
Extracción de la grasa del queso mediante pentano o éter de petróleo.
1.2 Material y aparatos.
1.2.1 Mortero.
1.2.2 Aparato de extracción continuo.
1.2.3 Baño de agua.
1.3 Reactivos.
1.3.1 Sulfato sódico anhidro.
1.3.2 Pentano o éter de petróleo (p. e. 40-60 °C).
1.4 Procedimiento.
Moler la muestra en un mortero con sulfato sódico anhidro hasta obtener una masa granulosa. Extraer la masa con pentano o éter de petróleo (se puede usar un aparato de extracción continuo) y evaporar el disolvente al baño de agua o a presión reducida.
1.5 Referencia.
1. Norma internacional FIL-IDF 32: 1965.
2. DETERMINACIÓN DEL CONTENIDO EN MATERIA GRASA
2.1 Principio.
El contenido de grasa se determina gravimétricamente por digestión del queso con ácido clorhídrico y subsiguientemente extracción de la grasa de una solución ácido-alcohólica con la ayuda de éter dietílico y éter de petróleo, evaporación de los disolventes y posterior pesada de los residuos.
La precisión del método es de 0,2 g de grasa por 100 g del producto.
2.2 Material y aparatos.
2.2.1 Balanza analítica.
2.2.2 Probetas o matraces de extracción adecuados provistos de tapones de vidrio esmerilado o corcho; dispositivos del cierre que no puedan ser atacados por los disolventes utilizados. Si se usan tapones de corcho deberán ser de buena calidad, sometiéndolos a extracción sucesivamente con éter dietílico y éter de petróleo. Después se introducirán, al menos durante veinte minutos, en agua a una temperatura de 60 °C o superior, dejándose enfriar en agua de forma que estén saturados cuando se utilicen.
2.2.3 Matraces de paredes delgadas y bases planas de 150 a 250 ml de capacidad.
2.2.4 Estufa de desecación regulable que permita trabajar a 102° ± 2 °C, o una estufa de desecación por vacío (temperatura de 70° a 75 °C, presión menor de 50 mm de Hg).
2.2.5 Perlas de vidrio o trozos de carburo de silicio, exento de grasa.
2.2.6 Baño de agua.
2.2.7 Hojas de película de celulosa, sin barnizar, solubles en ácido clorhídrico, de 0,03-0,05 mm de espesor y de 50 x 75 mm de superficie, aproximadamente. Las películas de celulosa no deben afectar al resultado del análisis.
2.2.8 Aparato adecuado para la trituración de la muestra.
2.3 Reactivos.
2.3.1 Ácido clorhídrico del 25 por 100 (p/p) (d20 = 1,125).
2.3.2 Etanol del 96 por 100 (v/v) (2.6.1).
2.3.3 Éter dietílico, exento de peróxidos (2.6.2).
2.3.4 Éter de petróleo que destile a una temperatura que oscile entre 30° y 60 °C.
2.3.5 La mezcla de disolventes se prepara poco antes de utilizarla, mezclando volúmenes iguales de 2.3.3 y 2.3.4 (2.6.3).
2.4 Procedimiento.
2.4.1 Preparación de la muestra.‒Antes de efectuar el análisis, eliminar la corteza, capa o superficie mohosa que recubre el queso, con objeto de obtener una muestra representativa del queso tal como se consume normalmente. Triturar la muestra con 2.2.8, mezclar la masa triturada rápidamente, y si es posible triturarla por segunda vez y mezclarla de nuevo concienzudamente (2.6.4). Pasar la muestra preparada a un recipiente cerrado herméticamente hasta el momento del análisis, que se efectuará en el mismo día (2.6.5).
2.4.2 Determinación.‒Secar el matraz 2.2.3 con 2.2.5 en la estufa durante un intervalo de media hora. Dejar que se enfríe el matraz a la temperatura ambiente de la balanza y pesar el matraz enfriado con aproximación de 0,1 mg.
Pesar, con aproximación de 1 mg en el aparato de extracción 2.2.2 o en un vaso o matraz de 100 ml, de 1 a 3 g de la muestra de queso preparada. La muestra del ensayo podrá también pesarse utilizando una lámina de celulosa 2.2.7, que posteriormente se plegará e introducirá en el tipo de vasija seleccionada.
Añadir de 8 a 10 ml de ácido clorhídrico (según la forma del aparato de extracción) y agitar la vasija ligeramente en un baño de agua hirviendo o sobre una llama hasta que el queso esté completamente disuelto. Dejar la vasija en reposo durante veinte minutos en el baño de agua hirviendo y después enfriar, por ejemplo, en agua corriente.
Si la digestión del queso se ha hecho en el aparato de extracción, añadir 10 ml de etanol y mezclar el contenido, removiéndolo ligeramente, pero de un modo homogéneo en el aparato sin cerrar.
Si la digestión del queso se ha hecho en una vasija distinta del matraz de extracción, verter el contenido de la vasija en este matraz. Enjuagarlo sucesivamente con 10 ml de etanol, 25 ml de éter dietílico y 25 ml de éter de petróleo, vertiendo cada vez el disolvente en el matraz de extracción. Después de cada adición mezclar y agitar el matraz de extracción, según se indica a continuación.
Añadir 25 ml de éter dietílico, cerrar el aparato y agitar vigorosamente, invirtiéndolo repetidamente durante un minuto. Enfriarlo, si es necesario, en agua corriente. Quitar el tapón cuidadosamente y añadir 25 ml de éter de petróleo, empleando los primeros ml para enjuagar el tapón y la superficie interna del cuello del aparato, dejando que el líquido de los enjuagues penetre en el mismo. Cerrarlo, volviendo a colocar el tapón, agitar e invertirlo repetidamente durante treinta segundos; no debe agitarse demasiado enérgicamente. Dejar el aparato en reposo hasta que la capa líquida superior esté completamente límpida y claramente separada de la capa acuosa. La separación podrá también efectuarse mediante el uso de una centrífuga adecuada (2.6.6). Quitar el tapón y enjuagarlo, así como también el interior del aparato con algunos ml de la mezcla de los disolventes y dejar que los líquidos de los enjuagues penetren en el aparato. Transvasar cuidadosamente al matraz 2.2.3, lo más completamente posible la capa superior por decantación o con ayuda de un sifón (2.6.7). Enjuagar el exterior y el interior del cuello del aparato o el extremo de la parte interior del sifón con unos cuantos mililitros de la mezcla de disolventes. Dejar que los líquidos de los enjuagues de la parte exterior del aparato penetren en el matraz y que los líquidos de los enjuagues de la parte interior del cuello y del sifón penetren en el aparato de extracción. Hacer una segunda extracción repitiendo el procedimiento descrito anteriormente (desde la adición de 25 ml de éter de petróleo), utilizando solamente 15 ml de éter dietílico y 15 ml de éter de petróleo. Hacer una tercera extracción, pero omitiendo el enjuague final.
Evaporar o destilar cuidadosamente la mayor cantidad posible de disolvente (incluido el etanol). Si el matraz es de poca capacidad, parte del disolvente tendrá que eliminarse en la forma citada anteriormente, después de cada extracción. Cuando haya desaparecido el olor a disolvente, calentar el matraz, apoyándolo sobre un lado durante una hora en la estufa. Dejar que el matraz se enfríe a la temperatura ambiente de la balanza y pesar con aproximación de 0,1 mg. Repetir las operaciones de calentar el matraz en estufa y pesar, calentando a intervalos de treinta a sesenta minutos, hasta que se obtenga una masa constante.
Añadir de 15 a 25 ml de éter de petróleo, con objeto de verificar si la materia extraída es totalmente soluble. Calentar ligeramente y agitar el disolvente mediante un movimiento rotatorio, hasta que se haya disuelto toda la grasa. Cuando la materia extraída sea totalmente soluble en el éter de petróleo, la masa de grasa será la diferencia entre las pesadas del matraz 2.2.3 y de la masa constante. En caso contrario extraer completamente la grasa del matraz mediante lavados repetidos con éter de petróleo caliente, dejando que se deposite la materia no disuelta antes de cada decantación. Enjuagar tres veces la parte exterior del cuello del matraz. Calentar el matraz, apoyándolo sobre un lado, durante una hora en la estufa y dejar que se enfríe a la temperatura ambiente de la balanza y pesar con aproximación de 0,1 mg. La masa de grasa será la diferencia entre la masa obtenida anteriormente y esta masa final.
2.4.3 Ensayo en blanco.
Al mismo tiempo que se determina el contenido de grasa de la muestra, efectuar una determinación en blanco con 10 ml de agua destilada, empleando el mismo tipo de aparato de extracción, los mismos reactivos en las mismas cantidades y el mismo procedimiento. Si el resultado del ensayo en blanco excede de 0,5 mg deberán comprobarse los reactivos, y el reactivo o reactivos impuros deberán purificarse o sustituirse.
2.5 Cálculos.
La masa, expresa en gramos, de la muestra extraída es:
(M1 ‒ M2) ‒ (B1 ‒ B2)
y el contenido de grasa en la muestra, expresado en porcentaje, de la masa es:
Siendo:
M1 = masa, en g, del matraz con la materia grasa extraída.
M2 = masa, en g, del matraz sin grasa.
B1 = masa, en g, del matraz del ensayo en blanco después de eliminar los disolventes.
B2 = masa, en g, del matraz del ensayo en blanco.
S = masa, en g, de la porción ensayada.
2.6 Observaciones.
2.6.1 Si no se dispone de etanol se puede utilizar etanol desnaturalizado con metanol, etilmetilcetona, benceno o éter de petróleo.
2.6.2 Para el ensayo de los peróxidos verter 10 ml de éter en una pequeña probeta tapada con tapón de vidrio, previamente enjuagada con éter, añadir 1 ml de solución al 10 por 100 de yoduro de potasio, recién preparada. Agitar y dejar reposar durante un minuto. No debe aparecer ningún color amarillo en ninguna de las capas. El éter dietílico podrá mantenerse exento de peróxidos, añadiendo una lámina de cinc húmeda, que deberá sumergirse completamente en una solución ácida diluida de sulfato de cobre durante un minuto y después lavar con agua. Utilizar por litro una superficie de 80 cm2 aproximadamente de lámina de cinc, cortarla en bandas suficientemente largas para que lleguen por lo menos hasta la mitad del recipiente.
2.6.3 La mezcla de disolventes podrá sustituirse en aquellos casos en que su utilización se haya previsto por éter dietílico o éter de petróleo.
2.6.4 Si la muestra no se pudiera triturar mezclarla cuidadosamente mediante un amasado intenso.
2.6.5 En caso de que haya que retrasar inevitablemente esta operación, tomar todas las precauciones necesarias para asegurar la conservación adecuada de la muestra e impedir la condensación de la humedad en la superficie interior.
2.6.6 Cuando se utilice una centrífuga que no esté provista de un motor trifásico pueden producirse chispas y entonces habrá que tomar las debidas precauciones para evitar explosiones o incendios debido a la presencia de los vapores de éter, por ejemplo, en el caso de una rotura de un tubo.
2.6.7 Si el trasvase no se efectúa mediante un sifón, quizá sea necesario tener que añadir un poco de agua para elevar el plano intermedio entre las dos capas, con objeto de facilitar la decantación.
2.7 Referencia.
1. Código de Principios referente a la Leche y a los Productos Lácteos. Norma B-3. FIL-IDE 5A: 1969.
3. DETERMINACIÓN DEL CONTENIDO DE EXTRACTO SECO
3.1 Principio.
El extracto seco del queso y de los quesos fundidos es la masa, expresada en porcentaje ponderal, que queda después del proceso de desecación.
La precisión del método es de ± 0,1 por 100.
3.2 Material y aparatos.
3.2.1 Balanza analítica, sensibilidad 0,1 mg.
3.2.2 Desecador provisto de un buen deshidratante (gel de sílice con indicador higrométrico o cloruro de calcio).
3.2.3 Estufa de desecación que permita obtener una temperatura constante hasta 110 °C.
3.2.4 Cápsulas de níquel o de aluminio de 2 cm de altura, aproximadamente, y de 6 a 8 cm de diámetro.
3.2.5 Arena de cuarzo de granos gruesos o arena marina purificada con ácido clorhídrico, lavada y calcinada.
3.2.6 Agitadores de vidrio con una extremidad plana.
3.3 Procedimiento.
Colocar 20 g de arena, aproximadamente, y un agitador de vidrio en la cápsula de níquel o de aluminio. Secar la cápsula con la arena y el agitador en la estufa a 105 °C, hasta peso constante. Dejar enfriar la cápsula en el desecador y pesar.
Colocar rápidamente en la cápsula, aproximadamente, 3 g de la muestra de queso preparada y pesar de nuevo.
Triturar cuidadosamente la masa de queso con la arena con ayuda del agitador (3.4.1). Secar la cápsula en la estufa durante cuatro horas a 105 °C. Dejar enfriar en el desecador y pesar.
Proseguir el secado hasta peso constante separando cada pesada por una permanencia en la estufa de media hora.
3.4 Observaciones.
3.4.1 Para los quesos que fundan a la temperatura de 105 °C en una masa córnea, se recomienda guardar primero la cápsula con la masa del queso triturado en el desecador durante dieciséis horas, a la presión atmosférica normal y a la temperatura del laboratorio. Se removerá de vez en cuando el contenido de la cápsula con el agitador, para evitar la formación de costras.
3.5 Referencias.
1. Federación Internacional de Lechería. Norma FIL-IDF 4: 1958.
4. DETERMINACIÓN DEL CONTENIDO EN FÓSFORO
4.1 Principio.
Mineralización de determinada cantidad de muestra con ayuda de ácido sulfúrico en presencia de peróxido de hidrógeno El fosfato se trata con molibdato de sodio y sulfato de hidrazina como agente reductor. El azul de molibdeno así formado se mide por fotometría, calculándose el contenido en fósforo.
La precisión del método es de 0,04 g de fósforo por 100 de producto.
4.2 Material y aparatos.
4.2.1 Balanza analítica
4.2.2 Colorímetro fotoeléctrico que permita lecturas a una longitud de onda de 700 nm.
4.2.3 Aparato apropiado para triturar la muestra.
4.2.4 Matraces Erlenmeyer de 25 ml.
4.2.5 Aparato de mineralización que mantenga los matraces Erlenmeyer en una posición inclinada y provisto de un sistema de calentamiento que no caliente la parte del matraz situada por encima de la superficie del líquido.
4.2.6 Cuerpos que faciliten la ebullición para la mineralización, trozos de porcelana o perlas de vidrio.
4.2.7 Matraces aforados de 50, 100, 200, 500 y 1.000 ml.
4.2.8 Pipetas y/o buretas de 1, 2, 5. 10, 20 y 25 ml.
4.3 Reactivos.
4.3.1 Ácido sulfúrico concentrado (densidad: 1,84 g/ml a 20 °C).
4.3.2 Solución de peróxido de hidrógeno al 30 por 100 (p/v).
4.3.3 Reactivo del molibdato y de sulfato de hidrazina.
4.3.3.1 Solución al 2,5 por 100 de molibdato de sodio.‒Disolver 12,5 g de molibdato de sodio Na2MoO4 • 2H2O en ácido sulfúrico 10 N, completando hasta 500 ml.
4.3.3.2 Solución al 0,15 por 100 de sulfato de hidrazina. Disolver 0,30 g de H2N NH2 • H2SO4, en agua destilada, completando hasta 200 ml.
4.3.3.3 Inmediatamente antes de su empleo, mezclar 25 ml de 4.3.3.1 con 10 ml de 4.3.3.2 y diluir la mezcla hasta 100 ml con agua destilada para preparar el reactivo de molibdato y de sulfato de hidrazina. Esta solución no puede conservarse.
4.3.3.4 Solución normalizada de fosfato.‒Disolver 0,4390 g de fosfato ácido monopotásico KH2P04 en agua destilada hasta obtener una solución de 1.000 ml. Esta solución contiene 100 μg de fósforo en 1 ml. El fosfato de potasio debe haber sido secado durante cuarenta y ocho horas en presencia de un agente de desecación eficaz, por ejemplo, el ácido sulfúrico concentrado. Todos los reactivos deben ser de calidad analítica.
4.4 Procedimiento.
4.4.1 Preparación de la muestra.
Antes del análisis se quitará la corteza o la cara superficial mohosa del queso de modo que se obtenga una muestra representativa del queso tal como se consume habitualmente. La muestra será triturada a continuación en un triturador u otro aparato apropiado y mezclada íntimamente, evitando las pérdidas por evaporación.
La muestra así preparada será conservada en un recipiente al abrigo del aire hasta su análisis, que deberá efectuarse el mismo día.
4.4.2 Determinación.
Introducir sucesivamente en el matraz Erlenmeyer 0,5 g de la muestra, pesados con exactitud de 1 mg, algunas perlas de vidrio o pequeños trozos de porcelana y 4 ml de ácido sulfúrico. Calentar con precaución el matraz Erlenmeyer sobre el aparato de mineralización. Al cesar la formación de espuma, enfriar a la temperatura ambiente; añadir con precaución algunas gotas de la solución de peróxido de hidrógeno, calentar de nuevo y repetir estas operaciones hasta que el contenido del matraz se encuentre límpido e incoloro. Durante el calentamiento, mezclar el contenido del matraz de tiempo en tiempo por agitación. Evitar los recalentamientos locales.
Enjuagar el cuello del matraz con unos 2 ml de agua destilada y calentar de nuevo hasta que el agua se haya evaporado. Dejar hervir el líquido durante una media hora después de la decoloración, con el fin de eliminar todo indicio de peróxido de hidrógeno. Evitar los recalentamientos locales.
Después del enfriamiento a la temperatura ambiente, traspasar el contenido del matraz a un matraz aforado de 100 ml; completar hasta el aforo con agua destilada y mezclar.
Llevar con la pipeta 1 ml de la solución a un matraz aforado de 50 ml y diluir con unos 25 ml de agua destilada. Añadir 20 ml del reactivo de molibdato y de sulfato de hidrazina, llenar el matraz hasta el aforo con agua destilada y mezclar. Colocar el matraz en agua hirviendo y dejar que se forme el color durante quince minutos.
Enfriar a la temperatura ambiente en agua fría y, antes de una hora, medir la densidad óptica con relación al ensayo en blanco (4.4.4) a una longitud de onda de 700 nm.
4.4.3 Preparación de la curva patrón.
Diluir en un matraz aforado 10 ml de la solución normalizada 4 3.4 con agua destilada y completar hasta 100 ml.
Introducir en cinco matraces aforados de 50 ml, 0, 1, 2, 5 y 10 ml de la solución normalizada diluida con el fin de obtener una serie de soluciones testigos que contengan o (valor cero), 10, 20, 50 y 100 μg de fósforo.
Añadir agua destilada a los matraces para obtener un volumen aproximado de 25 ml, añadir 20 ml del reactivo de molibdato y de sulfato de hidrazina, llenar hasta el aforo con agua destilada, mezclar, colocar el matraz con agua hirviendo y dejar que se forme el color durante quince minutos.
Enfriar a la temperatura ambiente en agua fría y medir la densidad óptica de los testigos con respecto al de valor cero, a una longitud de onda de 700 nm.
Determinar la curva patrón señalando las diferencias de densidad óptica con respecto a las cantidades de microgramos de fósforo.
4.4.4 Ensayo en blanco.
Efectuar un ensayo en blanco siguiendo el procedimiento expresado en 4.4.2, pero sin queso.
4.5 Cálculo.
Calcular el contenido en fósforo de la muestra por medio de la fórmula:
Siendo:
P = peso, en μg, de fósforo obtenido al convertir la medida obtenida en el colorímetro utilizando la curva patrón.
W = peso, en g, de la muestra tomada para el análisis.
4.6 Referencia.
1. Federación Internacional de Lechería. Norma FIL-IDF 33A: 1971.
5. DETERMINACIÓN DEL CONTENIDO EN ÁCIDO CÍTRICO
5.1 Principio.
Obtención de un filtrado claro por dispersión de la muestra en agua y clarificación por la adición de ácido tricloroacético. El filtrado se trata con piridina y anhídrido acético y se forma con el ácido cítrico un compuesto de color amarillo. El color obtenido se mide por fotometría.
La precisión del método es de 0,1 g de ácido cítrico anhidro por 100 g de producto.
5.2 Material y aparatos.
5.2.1 Balanza analítica, con precisión que permita de 0,001 g.
5.2.2 Colorímetro fotoeléctrico que permita lecturas a una longitud de onda de 428 nm.
5.2.3 Baño de agua con control termostático que permita una regulación a 32° ± 1 ºC.
5.2.4 Aparato apropiado para triturar la muestra.
5.2.5 Tubos de ensayo con tapones de vidrio o de plástico de 16 ó 18 por 150 mm.
5.2.6 Mortero y mano de porcelana de unos 50 ml.
5.2.7 Matraces aforados de 50, 100 y 1.000 ml.
5.2.8 Pipetas y buretas de 1; 1,3; 4; 5,7; 8; 12; 16, y 20 ml.
5.2.9 Embudos de vidrio de dimensiones apropiadas, por ejemplo, de 5 cm de diámetro.
5.2.10 Papel de filtro duro Whadman número 540, S y S 5893 o equivalente.
5.3 Reactivos.
5.3.1 Ácido tricloroacético al 30 por 100 (p/v).‒Disolver 300 g de ácido tricloroacético en agua destilada y diluir hasta 1.000 ml.
5.3.2 Piridina.
5.3.3 Anhídrico acético
Solución normalizada de citrato.‒Disolver 0,9565 g de citrato trisódico (C6H5O7Na3 • 2H2O) en agua destilada y diluir hasta 1.000 ml.
Todos los reactivos deben ser de calidad analítica.
5.4 Procedimiento.
5.4.1 Preparación de la muestra.
Antes del análisis se quitará la corteza o la capa superficial mohosa del queso de modo que se obtenga una muestra representativa del queso tal como se consume habitualmente. La muestra será triturada a continuación con un triturador u otro aparato apropiado y/o mezclada íntimamente evitando las pérdidas por evaporación. La muestra así preparada será conservada en un recipiente al abrigo del aire hasta su análisis, que deberá efectuarse el mismo día.
5.4.2 Determinación.
Colocar 0,5 g de la muestra, pesada con precisión de 0,001 g en un mortero de porcelana. Dispersar la muestra machacándola con la mano del mortero y añadiendo pequeñas cantidades de agua caliente (60° - 70 °C).
Transpasar el contenido del mortero a un matraz aforado de 100 ml, empleando unos 50 ml de agua. Enfriar a la temperatura ambiente.
Añadir 4. ml de la solución de ácido tricloroacético, mezclar por agitación, llenar con agua destilada hasta el aforo y mezclar de nuevo.
Dejar reposar a la temperatura ambiente durante treinta minutos y filtrar sobre un papel de filtro seco. Desechar la primera porción del filtrado hasta que se obtenga un líquido límpido; se desechará al menos 10 ml.
Introducir con ayuda de una pipeta 1 ml de filtrado claro en un tubo de ensayo provisto de tapón.
Añadir al tubo 1,3 ml de piridina. Mezclar y añadir inmediatamente 5,7 ml de anhídrido acético. Tapar el tubo y mezclar íntimamente su contenido, colocándolo inmediatamente en un baño de agua a 32 °C, dejándolo durante treinta minutos.
Retirar el tubo del baño de María, secarlo y medir la densidad óptica con relación al ensayo en blanco (5.4.4) a una longitud de onda de 428 nm antes de treinta minutos.
5.4.3 Preparación de la curva patrón.
Introducir en seis matraces de 50 ml 0, 4, 8, 12, 16 y 20 ml de la solución normalizada de citrato (5.3.4); añadir a cada matraz agua destilada hasta obtener un volumen aproximado de 25 ml. Añadir 20 ml de la solución de ácido tricloroacético (5.3.1); mezclar por agitación, llenar hasta el aforo con agua destilada y mezclar de nuevo.
Introducir con una pipeta 1 ml de cada solución patrón diluida en tubos de ensayo provistos de tapón, con el fin de obtener una serie de testigos que contengan 0 (valor cero), 50, 100, 150, 200 y 250 μg de ácido cítrico anhidro; añadir a cada tubo 1,3 ml de piridina. Mezclar y añadir inmediatamente 5,7 ml de anhídrido acético. Tapar el tubo y mezclar íntimamente su contenido. Colocar los tubos sin demora en un baño de agua a 32 °C y dejarlos durante treinta minutos.
Retirar los tubos del baño de agua, enfriar a temperatura ambiente, secarlos y medir la densidad óptica de los testigos con relación al valor cero, a una longitud de onda de 428 nm antes de treinta minutos.
Determinar la curva patrón señalando la diferencia de densidad óptica con relación a la cantidad de ácido cítrico anhidro en μg.
5.4.4 Ensayo en blanco.
Efectuar un ensayo en blanco siguiendo el procedimiento expresado anteriormente, pero sin muestra.
5.5 Cálculos.
Calcular el contenido en ácido cítrico anhidro por medio de la fórmula:
Siendo:
C = peso, en μg, de ácido cítrico obtenido al convertir la medida obtenida en el colorímetro utilizando la curva patrón.
W = peso, en g, de la muestra tomada para el análisis.
5.6 Referencia.
1. Federación Internacional de Lechería. Norma FIL-IDF 34B: 1971.
6. DETERMINACIÓN DEL CONTENIDO EN LACTOSA
6.1 Principio.
Preparación de un filtrado claro del queso por dispersión de la muestra en agua y defecación por ferrocianuro de cinc. A una parte del filtrado se le añade una solución que contiene un complejo cúprico. Se determina gravimétricamente el precipitado de óxido cuproso, formado por la acción reductora de la lactosa y los resultados obtenidos se convierten, con la ayuda de tablas, en lactosa anhidra o hidratada.
La precisión del método es de 0,15 g de lactosa anhidra por 100 g de producto.
6.2 Material y aparatos.
6.2.1 Balanza analítica. Sensibilidad, 0,1 mg.
6.2.2 Estufa regulable a 103 °C ± 2 °C.
6.2.3 Mortero de porcelana de un contenido aproximado de 300 ml, de un diámetro interior de unos 110 mm, con una mano apropiada.
6.2.4 Vaso de precipitados de 400 ml.
6.2.5 Crisol filtrante de porcelana de un contenido aproximado de 35 ml y de una porosidad media de 3-15 micras, cuyo peso no debe variar más de 1,0 mg cuando se le aplica el método operatorio descrito más adelante, sin utilizar el queso.
6.2.6 Desecador provisto de un agente de desecación eficaz, como el gel de sílice con indicador de humedad.
6.2.7 Matraz aforado de 500 ml.
6.2.8 Matraz Erlenmeyer de 500 ml.
6.2.9 Pipetas de 25 y 100 ml.
6.2.10 Probeta graduada de 20 ó 25 ml.
6.2.11 Embudo de vidrio de unos 150 mm de diámetro.
6.2.12 Vidrio de reloj destinado a cubrir el vaso de precipitados de 400 ml.
6.2.13 Varilla de vidrio con protección de goma en la punta.
6.2.14 Dispositivo de aspiración de una sección media.
6.2.15 Matraz de vacío con portacrisol.
6.2.16 Filtro plegado o filtro plano de porosidad media, de dimensión correspondiente al embudo 6.2.11.
6.3 Reactivos.
6.3.1 Solución de sulfato de cinc.
Disolver 30 g de sulfato de cinc cristalizado (Zn SO4• 7H2O) en agua destilada, completando hasta 100 ml.
6.3.2 Solución de ferrocianuro de potasio.
Disolver 15 g de ferrocianuro de potasio cristalizado K4Fe (CN)6 3H2O en agua destilada completando hasta 100 ml.
6.3.3 Solución de sulfato de cobre.
Disolver 70 g de sulfato de cobre (Cu SO4 • 5H2O) en agua destilada, completando hasta 1.000 ml y filtrando si es necesario.
6.3.4 Solución de tartrato alcalino.
Disolver 350 g de tartrato de sodio-potasio (KNa C4H4O5 • 4H2O) y 100 g de hidróxido sódico (NaOH) en agua destilada, completando hasta 1.000 ml. Dejar reposar dos días en un frasco tapado y filtrar. La solución se deteriorará al cabo de un cierto tiempo, lo que puede falsear el ensayo en blanco (resultados más elevados).
6.3.5 Ácido nítrico diluido: HNO3 al 15-20 por 100 en peso.
6.3.6 Alcohol etílico del 96 por 100. Puede ser desnaturalizado con un desnaturalizante apropiado que no deje residuos después de la evaporación.
Los reactivos deben ser de calidad analítica.
6.4 Procedimiento.
6.4.1 Preparación de la muestra para el ensayo.
Antes del análisis se quitará la corteza o capa superficial mohosa del queso, a fin de obtener una muestra representativa del queso tal como habitualmente se consume. La muestra será triturada a continuación en un triturador u otro aparato apropiado y mezclada íntimamente, evitando las pérdidas por evaporación. La muestra así preparada será conservada en un recipiente cerrado hasta su análisis, que deberá efectuarse el mismo día.
6.4.2 Determinación.
Lavar el crisol filtrante con ácido nítrico diluido, enjuagarlo perfectamente con agua caliente y después con 10 ml de alcohol. Secar el crisol a 103 °C ± 2 °C durante treinta minutos, enfriar en un desecador y pesar.
Colocar, aproximadamente, 10 g de la muestra, pesados exactamente, en un mortero de porcelana. Dispersar la muestra machacándola con la mano del mortero, añadiendo pequeñas cantidades de agua caliente (60° - 70 °C). Trasvasar el contenido del mortero a un matraz aforado de 500 ml. Diluir en 400 ml, aproximadamente.
Añadir 5 ml de la solución de sulfato de cinc, mezclando suavemente por rotación del matraz alrededor de su eje, manteniéndolo inclinado. Añadir del mismo modo 5 ml de la solución de ferrocianuro de potasio.
Enfriar el contenido del matraz a 20 °C y completar con agua destilada (a 20 °C) hasta el aforo. Cerrar el matraz con un tapón seco y mezclar íntimamente su contenido mediante una agitación enérgica. Filtrar con un papel de filtro seco, desechando los primeros ml de filtrado.
Tomar con una pipeta 25 ml de la solución de sulfato de cobre (6.3.3) y 25 ml de la solución de tartrato alcalino (6 3.4) y llevarlo a un vaso de precipitado de 400 ml. Mezclar por movimiento de rotación. Calentar la muestre hasta ebullición. Añadir 100 ml del filtrado de la muestra con ayuda de una pipeta. Cubrir el vaso con un vidrio de reloj y calentar de nuevo. Detener el calentamiento exactamente seis minutos después de alcanzar nuevamente el punto de ebullición.
Para asegurar una ebullición más regular y para evitar las proyecciones del líquido, se podrán añadir pequeños trozos de piedra pómez tratados previamente de la misma manera que el crisol y pesados con este último.
Enjuagar el vidrio de reloj con un poco de agua destilada caliente encima del vaso. Trasvasar todo el contenido del vaso a un crisol filtrante preparado previamente (según se indica con anterioridad). Para efectuar este trasvase ayudarse de chorros de agua destilada caliente y de una varilla de vidrio con protección de goma en la punta. El filtrado debe ser de color azul. Si es incoloro, repetir el análisis utilizando una cantidad más pequeña de filtrado diluida en 100 ml.
Enjuagar cuidadosamente el crisol filtrante con agua destilada caliente y después con lo ml de alcohol. Secar el crisol durante treinta minutos a 103 °C ± 2 °C, enfriar en un desecador y pesar.
6.4.3 Ensayo en blanco.
Efectuar un ensayo en blanco siguiendo el procedimiento descrito pero utilizando 10 ml de agua destilada en lugar de 10 g de queso.
6.5 Cálculos.
Corregir la masa de óxido cuproso encontrada en el análisis de la muestra restándole el resultado del ensayo en blanco. Buscar en las tablas la cantidad de lactosa anhidra o hidratada correspondiente a la masa corregida de óxido cuproso.
Calcular el contenido en lactosa anhidra o hidratada de la muestra con ayuda de la fórmula siguiente:
Siendo:
A = masa, en g, de lactosa anhidra o hidratada encontrada en la tabla.
E = masa, en g, de la muestra de ensayo.
V = volumen, en ml, del filtrado utilizado.
0,99 = factor de corrección para compensar el error de volumen que resulta de la presencia de materia grasa y proteínas en la muestra.
6.6 Referencia.
1. Federación Internacional de Lechería. Norma FIL-IDF 43: 1967.
Tabla para determinar la cantidad de lactosa (monohidrataday anhidra) en miligramos, según la cantidad de óxido cuprosoen miligramos
| Óxido cuproso (Cu2O) en mg | Lactosa monohidratada (C12H22O11 1 H2O) en mg | Lactosa anhidra (C12H22O11) en mg |
|---|---|---|
| 10 | 5,1 | 4,8 |
| 11 | 5,8 | 5,5 |
| 12 | 6,4 | 6,1 |
| 13 | 7,1 | 6,7 |
| 14 | 7,7 | 7,3 |
| 15 | 8,4 | 8,0 |
| 16 | 9,0 | 8,6 |
| 17 | 9,7 | 9,2 |
| 18 | 10,3 | 9,8 |
| 19 | 11,0 | 10,5 |
| 20 | 11,6 | 11,0 |
| 21 | 12,3 | 11,7 |
| 22 | 12,9 | 12,3 |
| 23 | 13,6 | 12,9 |
| 24 | 14,2 | 13,5 |
| 25 | 14,8 | 14,1 |
| 26 | 15,5 | 14,7 |
| 27 | 16,2 | 15,4 |
| 28 | 16,8 | 16,0 |
| 29 | 17,7 | 16,6 |
| 30 | 18,1 | 17,2 |
| 31 | 18,7 | 17,8 |
| 32 | 19,4 | 18,4 |
| 33 | 20,0 | 19,0 |
| 34 | 20,7 | 19,7 |
| 35 | 21,3 | 20,2 |
| 36 | 22,0 | 20,9 |
| 37 | 22,6 | 21,5 |
| 38 | 23,3 | 22,1 |
| 39 | 23,9 | 22,7 |
| 40 | 24,6 | 23,4 |
| 41 | 25,2 | 23,9 |
| 42 | 25,9 | 24,6 |
| 43 | 26,5 | 25 2 |
| 44 | 27,2 | 25,8 |
| 45 | 27,8 | 26,4 |
| 46 | 28,5 | 27,1 |
| 47 | 29,1 | 27,6 |
| 48 | 29,8 | 28,3 |
| 49 | 30,4 | 28,9 |
| 50 | 31,4 | 29,5 |
| 51 | 31,7 | 30.1 |
| 52 | 32,4 | 30,8 |
| 53 | 33,0 | 31,4 |
| 54 | 33,7 | 32,0 |
| 55 | 34.3 | 32,6 |
| 56 | 34,9 | 33,2 |
| 57 | 35,3 | 33,8 |
| 58 | 36,2 | 34,4 |
| 59 | 36,9 | 35.1 |
| 60 | 37,5 | 35,6 |
| 61 | 38,2 | 36,3 |
| 62 | 38,8 | 36,9 |
| 63 | 39,4 | 37,4 |
| 64 | 40,1 | 38,1 |
| 65 | 40,8 | 38,8 |
| 66 | 41,4 | 39,3 |
| 67 | 42,0 | 39,9 |
| 68 | 42,7 | 40,6 |
| 69 | 43,3 | 41,1 |
| 70 | 44,0 | 41,8 |
| 71 | 44,6 | 42.4 |
| 72 | 45,3 | 43,0 |
| 73 | 45,9 | 43.6 |
| 74 | 46,6 | 44,3 |
| 75 | 47,2 | 44,8 |
| 76 | 47,9 | 45,5 |
| 77 | 48,5 | 46.1 |
| 78 | 49,2 | 46.7 |
| 79 | 49,8 | 47,3 |
| 80 | 50,4 | 47,9 |
| 81 | 51,1 | 48,5 |
| 82 | 51,8 | 49.2 |
| 83 | 52,4 | 49,8 |
| 84 | 53,1 | 50,4 |
| 85 | 53,7 | 51,0 |
| 86 | 54,4 | 51.7 |
| 87 | 55,0 | 52,3 |
| 88 | 55,7 | 52,9 |
| 89 | 56,3 | 53,5 |
| 90 | 57,0 | 54,3 |
| 91 | 57,6 | 54,7 |
| 92 | 58,2 | 55,3 |
| 93 | 58,9 | 56,0 |
| 94 | 59,5 | 56,5 |
| 95 | 60,2 | 57,2 |
| 96 | 60,8 | 57,8 |
| 97 | 61,4 | 58,3 |
| 98 | 62,1 | 59,0 |
| 99 | 62,8 | 59,7 |
| 100 | 63,4 | 60,2 |
| 101 | 64,0 | 60,8 |
| 102 | 64,6 | 61,4 |
| 103 | 65,3 | 62,0 |
| 104 | 66,0 | 62,7 |
| 105 | 66,6 | 63,3 |
| 106 | 67,2 | 63,8 |
| 107 | 67,9 | 64,5 |
| 108 | 68,6 | 65,2 |
| 109 | 69,2 | 65,7 |
| 110 | 69,9 | 66,4 |
| 111 | 70.5 | 67,0 |
| 112 | 71,2 | 37,6 |
| 113 | 71,9 | 68,3 |
| 114 | 72,5 | 68,9 |
| 115 | 73,2 | 69,5 |
| 116 | 73,8 | 70,1 |
| 117 | 74,5 | 70,8 |
| 118 | 75,1 | 71,3 |
| 119 | 75,8 | 72,0 |
| 120 | 76,5 | 72,7 |
| 121 | 77,1 | 73,2 |
| 122 | 77,7 | 73,8 |
| 123 | 78,4 | 74,5 |
| 124 | 79,1 | 75,1 |
| 125 | 79,8 | 75,8 |
| 126 | 80,4 | 76,4 |
| 127 | 81,0 | 77,0 |
| 128 | 81,7 | 77,6 |
| 129 | 82,3 | 78,2 |
| 130 | 83,0 | 78,9 |
| 131 | 83,7 | 79,5 |
| 132 | 84,4 | 80,2 |
| 133 | 85,0 | 80,8 |
| 134 | 85,6 | 81,3 |
| 135 | 86.3 | 82,0 |
| 136 | 87,0 | 82,7 |
| 137 | 87,7 | 83,3 |
| 138 | 88.3 | 83,9 |
| 139 | 89,0 | 84,6 |
| 140 | 89,6 | 85,1 |
| 141 | 90,3 | 85,8 |
| 142 | 91,0 | 86,5 |
| 143 | 91,6 | 87,0 |
| 144 | 92,2 | 87,6 |
| 145 | 92,9 | 88,3 |
| 146 | 93,6 | 88,9 |
| 147 | 94,3 | 89,6 |
| 148 | 94,9 | 90,2 |
| 149 | 95,6 | 90,8 |
| 150 | 96,2 | 91,4 |
| 151 | 96,9 | 92,1 |
| 152 | 97,6 | 92,7 |
| 153 | 98,2 | 93,3 |
| 154 | 98,8 | 93,9 |
| 155 | 99,5 | 94,5 |
| 156 | 100,2 | 95,2 |
| 157 | 100,8 | 95,8 |
| 158 | 101,5 | 96,4 |
| 159 | 102,2 | 97,1 |
| 160 | 102,8 | 97,7 |
| 161 | 103,5 | 98,3 |
| 162 | 104,2 | 90,0 |
| 163 | 104,9 | 99,7 |
| 164 | 105,6 | 100,3 |
| 165 | 106,2 | 100,9 |
| 166 | 106,9 | 101,6 |
| 167 | 107,6 | 102,2 |
| 168 | 108,2 | 102,8 |
| 169 | 108,9 | 103,5 |
| 170 | 109.6 | 104,4 |
| 171 | 110,2 | 104,7 |
| 172 | 110,9 | 105,4 |
| 173 | 111,6 | 106,0 |
| 174 | 112,3 | 106,7 |
| 175 | 113,0 | 107,4 |
| 176 | 113,6 | 107,9 |
| 177 | 114,3 | 108,6 |
| 178 | 115,0 | 109,3 |
| 179 | 115,6 | 109,8 |
| 180 | 116,3 | 110,5 |
| 181 | 117,0 | 111,2 |
| 182 | 117,6 | 111,7 |
| 183 | 118,3 | 112,4 |
| 184 | 119,0 | 113,1 |
| 185 | 119,7 | 113,7 |
| 186 | 120.3 | 114,3 |
| 187 | 121,0 | 115,0 |
| 188 | 121,7 | 115,6 |
| 189 | 122,4 | 116,3 |
| 190 | 123,0 | 116,9 |
| 191 | 123,7 | 117,5 |
| 192 | 124,3 | 118,1 |
| 193 | 125,0 | 118,8 |
| 194 | 125,6 | 119,3 |
| 195 | 126,3 | 120,0 |
| 196 | 127,0 | 120,7 |
| 197 | 127,7 | 121,3 |
| 198 | 128,4 | 122,0 |
| 199 | 129,1 | 122,6 |
| 200 | 129,7 | 123,2 |
| 201 | 130,4 | 123,9 |
| 202 | 131,1 | 124,5 |
| 203 | 131,8 | 125,2 |
| 204 | 132,4 | 125,8 |
| 205 | 133,1 | 126,4 |
| 206 | 133,8 | 127,1 |
| 207 | 134,5 | 127,8 |
| 208 | 135,2 | 128,4 |
| 209 | 135,8 | 129,0 |
| 210 | 136,5 | 129,7 |
| 211 | 137,2 | 130,3 |
| 212 | 137,9 | 131,0 |
| 213 | 138,6 | 131,7 |
| 214 | 139,3 | 132,3 |
| 215 | 140,0 | 133,0 |
| 216 | 140,6 | 133,6 |
| 217 | 141,3 | 134,2 |
| 218 | 142,0 | 134,9 |
| 219 | 142.6 | 135.5 |
| 220 | 143,3 | 136,1 |
| 221 | 144,0 | 136,8 |
| 222 | 144.7 | 137.5 |
| 223 | 145,4 | 138,1 |
| 224 | 146,1 | 138,7 |
| 225 | 146,8 | 139,5 |
| 226 | 147,5 | 140,1 |
| 227 | 148,1 | 140,7 |
| 228 | 148,8 | 141,4 |
| 229 | 149,4 | 141,9 |
| 230 | 150,1 | 142,6 |
| 231 | 150,8 | 143,3 |
| 232 | 151,4 | 143,8 |
| 233 | 152,1 | 144,5 |
| 234 | 152,8 | 145,2 |
| 235 | 153,4 | 145,7 |
| 236 | 154,1 | 146,4 |
| 237 | 154,8 | 147,1 |
| 238 | 155,4 | 147,6 |
| 239 | 156,1 | 148,3 |
| 240 | 156,9 | 149,1 |
| 241 | 157,4 | 149,5 |
| 242 | 158,1 | 150,2 |
| 243 | 158,7 | 150,8 |
| 244 | 159,4 | 151,4 |
| 245 | 160,1 | 152,1 |
| 246 | 160,7 | 152,7 |
| 247 | 161,4 | 153,3 |
| 248 | 162,0 | 153,9 |
| 249 | 162,7 | 154,6 |
| 250 | 163,4 | 155,2 |
| 251 | 164,0 | 155,8 |
| 252 | 164.7 | 156.5 |
| 253 | 165,4 | 157,4 |
| 254 | 166,0 | 157,7 |
| 255 | 166.7 | 158.4 |
| 256 | 167,3 | 158,9 |
| 257 | 168,0 | 159.6 |
| 258 | 168.7 | 160,3 |
| 259 | 169,4 | 160,9 |
| 260 | 170,0 | 161,5 |
| 261 | 170,7 | 162,2 |
| 262 | 171,3 | 162,7 |
| 263 | 172,0 | 163,4 |
| 264 | 172,6 | 164,0 |
| 265 | 173,3 | 164,6 |
| 266 | 174,0 | 165,3 |
| 267 | 174,7 | 166,0 |
| 268 | 175,4 | 166,6 |
| 269 | 176,1 | 167,3 |
| 270 | 176,8 | 168,0 |
| 271 | 177,5 | 168,6 |
| 272 | 178,2 | 169,3 |
| 273 | 178,8 | 169,9 |
| 274 | 179,5 | 170,5 |
| 275 | 180,2 | 171,2 |
| 276 | 180,9 | 171,9 |
| 277 | 181,6 | 172,5 |
| 278 | 182,3 | 173,2 |
| 279 | 183,0 | 173,9 |
| 280 | 183,6 | 174,4 |
| 281 | 184,3 | 175,1 |
| 282 | 185,0 | 175,8 |
| 283 | 185,7 | 176,4 |
| 284 | 186,4 | 177,1 |
| 285 | 187,1 | 177,7 |
| 286 | 187,8 | 178,4 |
| 287 | 188,5 | 179,1 |
| 288 | 189,1 | 179,6 |
| 289 | 189,8 | 180,3 |
| 290 | 190,5 | 181,0 |
| 291 | 191,2 | 181,6 |
| 292 | 191,9 | 182.3 |
| 293 | 192,6 | 183,0 |
| 294 | 193,3 | 183,6 |
| 295 | 194,0 | 184.3 |
| 296 | 194,7 | 185,0 |
| 297 | 195,4 | 185,6 |
| 298 | 196,0 | 186,2 |
| 299 | 196,7 | 186,9 |
| 300 | 197,4 | 187,5 |
| 301 | 198,1 | 188,2 |
| 302 | 198,8 | 188,9 |
| 303 | 199,5 | 189,5 |
| 304 | 200,2 | 190,2 |
| 305 | 200,9 | 190,9 |
| 306 | 201,6 | 191,5 |
| 307 | 202,3 | 192,2 |
| 308 | 203,0 | 192,9 |
| 309 | 203,7 | 193,5 |
| 310 | 204,4 | 194,2 |
| 311 | 205,2 | 194,9 |
| 312 | 205,9 | 195,6 |
| 313 | 206,6 | 196,3 |
| 314 | 207,3 | 196,9 |
| 315 | 208,0 | 197,6 |
| 316 | 208,7 | 198,3 |
| 317 | 209,5 | 199,0 |
| 318 | 210,2 | 199,7 |
| 319 | 210,9 | 200,4 |
| 320 | 211,6 | 201,0 |
| 321 | 212,3 | 201,7 |
| 322 | 213,0 | 202,4 |
| 323 | 213,7 | 203,0 |
| 324 | 214,4 | 203,7 |
| 325 | 215,2 | 204,4 |
| 326 | 215,9 | 205,1 |
| 327 | 216,6 | 205,8 |
| 328 | 217,3 | 206,4 |
| 329 | 218,0 | 207,1 |
| 330 | 218,8 | 207,9 |
| 331 | 219,5 | 208,5 |
| 332 | 220,2 | 209,2 |
| 333 | 220,9 | 209,9 |
| 334 | 221,6 | 210,5 |
| 335 | 222,4 | 211,3 |
| 336 | 223,1 | 211,9 |
| 337 | 223,8 | 212,6 |
| 338 | 224,5 | 213,3 |
| 339 | 225,2 | 213,9 |
| 340 | 225,9 | 214,6 |
| 341 | 226,6 | 215,3 |
| 342 | 227,2 | 215,8 |
| 343 | 227,9 | 216,5 |
| 344 | 228,6 | 217,2 |
| 345 | 229,3 | 217,8 |
| 346 | 230,0 | 218,5 |
| 347 | 230,7 | 219,2 |
| 348 | 231,4 | 219,8 |
| 349 | 232,1 | 220,5 |
| 350 | 232,8 | 221,2 |
| 351 | 233,5 | 221,8 |
| 352 | 234,2 | 222,5 |
| 353 | 234,9 | 223,2 |
| 354 | 235,6 | 223,8 |
| 355 | 236,2 | 224,4 |
| 356 | 237,0 | 225,2 |
| 357 | 237,7 | 225,8 |
| 358 | 238,4 | 226,5 |
| 359 | 239,1 | 227,1 |
| 360 | 239,8 | 227,8 |
| 361 | 240,5 | 228,5 |
| 362 | 241,2 | 229,1 |
| 363 | 241,8 | 229,7 |
| 364 | 242,5 | 230,4 |
| 365 | 243,2 | 231,0 |
| 366 | 243,9 | 231,7 |
| 367 | 244,6 | 232,4 |
| 368 | 245,2 | 232,9 |
| 369 | 245,9 | 233,6 |
| 370 | 246,6 | 234,3 |
| 371 | 247,3 | 234,9 |
| 372 | 248,0 | 235,6 |
| 373 | 248,7 | 236.3 |
| 374 | 249,4 | 236,9 |
| 375 | 250,1 | 237,6 |
| 376 | 250,8 | 238.3 |
| 377 | 251,3 | 239,0 |
| 378 | 252,3 | 239,7 |
| 379 | 253,0 | 2^0,4 |
| 380 | 253,7 | 241,0 |
| 381 | 254,4 | 241,7 |
| 382 | 255,1 | 242,3 |
| 383 | 255,8 | 243,0 |
| 384 | 256,6 | 243,8 |
| 385 | 257,3 | 244,4 |
| 386 | 258,0 | 245,1 |
| 387 | 258,7 | 245,8 |
| 388 | 259,5 | 246,5 |
| 389 | 260,2 | 247,2 |
| 390 | 260,9 | 247,9 |
| 391 | 261,6 | 248,5 |
| 392 | 262,3 | 249,2 |
| 393 | 263,1 | 249,9 |
| 394 | 263,8 | 250,6 |
| 395 | 264,5 | 251,3 |
| 396 | 265,2 | 251,9 |
| 397 | 265,9 | 252,6 |
| 398 | 266,7 | 253,4 |
| 399 | 267,4 | 254,0 |
| 400 | 268,1 | 254,7 |
| 401 | 268,8 | 255,4 |
| 402 | 269,6 | 256,1 |
| 403 | 270,3 | 256,8 |
| 404 | 271,0 | 257,5 |
| 405 | 271,8 | 258,2 |
| 406 | 272,5 | 258,9 |
| 407 | 273,2 | 259,5 |
| 408 | 274,0 | 260.3 |
| 409 | 274,7 | 261,0 |
| 410 | 275,5 | 261,7 |
| 411 | 276,2 | 262.4 |
| 412 | 276,9 | 263,1 |
| 413 | 277,7 | 263,8 |
| 414 | 278,4 | 264,5 |
| 415 | 279,1 | 265,1 |
| 416 | 279,9 | 265,9 |
| 417 | 280,6 | 266,6 |
| 418 | 281,4 | 267,3 |
| 419 | 282,2 | 268,1 |
| 420 | 283,0 | 268,9 |
| 421 | 283,7 | 269,5 |
| 422 | 234,5 | 270,3 |
| 423 | 285,2 | 270,9 |
| 424 | 286,0 | 271,7 |
| 425 | 286,8 | 272,5 |
| 426 | 287,6 | 273,2 |
| 427 | 288,3 | 273,9 |
| 428 | 289,1 | 274.6 |
| 429 | 289,9 | 275,4 |
| 430 | 290,7 | 276,2 |
| 431 | 291,4 | 276,8 |
| 432 | 292,2 | 277,6 |
| 433 | 293,0 | 278,4 |
| 434 | 293,8 | 279,1 |
| 435 | 294,5 | 279,8 |
| 436 | 295,3 | 280,5 |
| 437 | 296,0 | 281,2 |
| 438 | 296,8 | 282,0 |
| 439 | 297,6 | 282,7 |
| 440 | 298,4 | 283,5 |
| 441 | 299,2 | 284,2 |
| 442 | 299,9 | 284,9 |
| 443 | 300,7 | 285,7 |
| 444 | 301,4 | 286,3 |
| 445 | 302,2 | 287,1 |
| 446 | 303,0 | 287,9 |
| 447 | 303,7 | 288,5 |
| 448 | 304,5 | 289,3 |
| 449 | 305,2 | 289,9 |
| 450 | 306,0 | 290,7 |
LECHE
4. LACTOSA
4.1 Principio.
Después de desproteinización y filtración de la leche, la lactosa se determina por valoración de la cantidad de halógeno reducido en el curso de la reacción entre la lactosa y el conjunto ioduro de potasio cloramina T.
Este método es aplicable a la leche natural, no alterada, así como a las conservadas por adición de formaldehido (1:2.500).
El procedimiento es el que figura en el método número 4 del anejo III de la Orden de 31 de enero de 1977 («Boletín Oficial del Estado» de 14 de julio).
9. SACAROSA
(Determinación polarimétrica en la leche condensada)
9.1 Principio.
La determinación se basa en el principio de inversión de Clerget: mediante un tratamiento suave por ácido se hidroliza completamente la sacarosa, mientras la lactosa y los otros azúcares prácticamente no se hidrolizan. El contenido en sacarosa se deduce del cambio del poder rotatorio de la solución y se expresa en porcentaje en peso.
Este método es aplicable a leche condensada, entera o desnatada.
El procedimiento es el que figura en el método número 9 del anejo III de la Orden de 31 de enero de 1977 («Boletín Oficial del Estado» de 14 de julio).
14(a). HARINA DE ALFALFA
(Método comparativo)
14(a).1 Principio.
Determinación de harina de alfalfa en leche desnaturalizada por comparación visual y microscópica frente a muestras patrón.
14(a).2 Material y aparatos.
14(a).2.1 Tamiz de 0,25 mm de luz de malla.
14(a).2.2 Lupa para 10 a 20 aumentos.
14(a).2.3 Material necesario para observación microscópica.
14(a).3 Procedimiento.
14(a).3.1. Preparación de la muestra patrón de harina de alfalfa.
Mezclar íntimamente muestras de harina de alfalfa adquiridas en el mercado, finamente molidas.
Tamizar la harina obtenida empleando el tamiz 14(a).2.1.
Separar las dos fracciones y mezclarlas en la siguiente proporción: 98 partes de la fracción más fina y 2 de la más gruesa.
Dicha mezcla se considera como muestra patrón de harina de alfalfa.
14(a).3.2 Preparación de las muestras patrón de leche en polvo-harina de alfalfa.
Mezclar y homogeneizar leche en polvo sin desnaturalizar y la muestra patrón de harina de alfalfa obtenida, según las siguientes proporciones:
| Gramos de leche en polvo. | 99 | 98,5 | 98 | 97,5 | 97 | 96,5 | 96 |
| Gramos de harina de alfalfa. | 1 | 1,5 | 2 | 2,5 | 3 | 3,5 | 4 |
| Porcentaje de harina de alfalfa. | 1 % | 1,5 % | 2 % | 2,5 % | 3 % | 3,5 % | 4 % |
Realizar con estas muestras patrón una serie de preparaciones, colocando en el centro de un portaobjetos 0,6 g aproximadamente de cada una de las muestras. Cubrir con otro portaobjetos y extender el polvo mediante compresión y giro de los dos vidrios, hasta lograr una lámina circular de unos 2 cm de diámetro. Sujetar los dos portaobjetos fijando los extremos con papel adhesivo transparente.
La colección de patrones así obtenida se conserva para ulteriores determinaciones.
14(a).3.3 Determinación de la harina de alfalfa contenida en la muestra de leche en polvo a analizar.
Obtener una preparación en forma análoga a la anteriormente descrita y comparar con las muestras patrón de leche en polvo-harina de alfalfa, separando aquellas que, a simple vista, sean análogas o muy próximas a la muestra problema.
Proceder a una comparación microscópica entre la muestra a analizar y cada una de las muestras separadas, empleando lupa de 10 a 20 aumentos, considerando tanto el tamaño como la densidad de las partículas que aparecen en una serie de campos, obteniendo valores medios y expresando los resultados en porcentaje de harina de alfalfa contenida en la leche en polvo analizada.
14(a).4 Referencias.
1. A López, M del C. Díaz-Peñalver y J. Gutiérrez: «Leches desnaturalizadas. Comprobación de la desnaturalización de las mismas».
14(b). HARINA DE ALFALFA
(Método gravimétrico)
14(b).1 Principio.
Separación de las partículas de alfalfa por lavado con agua y posterior determinación gravimétrica.
14(b).2 Material y aparatos.
14(b).2.1 Vaso de precipitados de 250 ml.
14(b).2.2 Tamiz de 0,25 mm de luz de malla.
14(b).2.3 Embudo.
14(b).2.4 Matraz Erlenmeyer de 2.000 ml.
14(b).2.5 Trompa de vacío.
14(b).2.6 Placa filtrante de vidrio del número 1.
14(b).2.7 Estufa de desecación.
14(b).3 Procedimiento.
Pesar 50 g de leche desnaturalizada en un vaso de precipitados de 250 ml y adicionar 150 ml de agua. Una vez bien impregnada la leche desnaturalizada, formar una papilla fina por agitación mediante una varilla con el extremo curvado en forma de U.
Añadir a continuación otros 100 ml de agua, agitar y pasar la papilla a través del tamiz 14(b).2.2 (previamente desecado a 100 °C hasta peso constante, con precisión de 0,01 g) colocado sobre un embudo y éste a su vez sobre un matraz Erlenmeyer de 2.000 ml (fig. 1).
Lavar el vaso y el tamiz añadiendo poco a poco agua a 40 °C en chorro fino, removiendo los pequeños grumos con ayuda de la varilla hasta que toda la leche haya sido arrastrada por el agua. Se precisan aproximadamente 1,5 litros.
Dejar escurrir el tamiz y desecarlo en estufa a 100 °C, colocado sobre un papel de filtro.
Una vez desecado el tamiz hasta peso constante, se pesa con aproximación de 0,0i g, recogiéndose en él previamente las partículas que pudieran haber caído en el papel de filtro a medida que se producía la desecación de la harina de alfalfa. Se obtiene así un peso p1.
Las partículas de alfalfa, a causa de la humedad, sufren un hinchamiento, por lo que es necesario tamizar de nuevo después de la desecación y de exponer el tamiz a humedad ambiente durante dos horas, obteniéndose así el peso p2 de la cantidad retenida por el mismo.
La consulta de este documento no sustituye la lectura del Boletín Oficial del Estado correspondiente. No nos responsabilizamos de posibles incorrecciones producidas en la transcripción del original a este formato.
Este texto se publica bajo las condiciones de reutilización propias de BOE, no bajo una licencia de Legalize ni de dominio público.
BOE
Condiciones de reutilización del BOE — cita obligatoria de la fuente
Fuente de los datos: Agencia Estatal Boletín Oficial del Estado (https://www.boe.es). Datos reutilizados conforme a las condiciones de reutilización del BOE (Resolución de 27 de junio de 2024). Este repositorio es una obra derivada basada en datos de la Agencia Estatal Boletín Oficial del Estado.